Tímto jsme se popsat, v případě 15-rok-starý chlapec, diagnostikován se závažnou alergií na vaječné proteiny, kdo byl odkazoval se na naší Klinice, protože on nikdy nedostal MMR očkování, a to navzdory skutečnosti, že to bylo povinné. Proto nemohl být přijat do školy, dále. Vskutku, Jeho rodiče považovali očkování MMR za vysoce rizikové kvůli jeho základní alergii na vejce.
bylo provedeno důkladné alergologické zpracování.
pokud jde o klinickou anamnézu, byl hlášen jediný nežádoucí účinek na vejce, který se objevil v raném dětství (9 měsíců) po prvním požití vařeného vajíčka. Typicky, příznaky zahrnovaly sípání, dušnost, změna tónu hlasu, kašel, plakat, a bledost. Rychlé zapojení dýchacích cest je uvedeno, že reakce byla závažná (dítě byl hospitalizován a léčen kortikosteroidy a antihistaminika). Po této události byla vejce zcela vyloučena z dětské stravy. Navíc, když bylo dítě 9 let, trpěl anafylaktickým šokem po požití piniových oříšků.
Kvantitativní trubek a dutých profilů byly provedeny s řadou 36 komerčně dostupných potravinových alergenů (Lofarma, Milán, Itálie), reflexní spektra, alergie na potraviny v Jižní Itálii (kde lidé konzumují typickou Středomořskou Stravu). Bylo zjištěno několik senzibilizací, včetně arašídů, mandlí, lískových ořechů, pšenice a zejména vaječného bílku (obr. 1a). Provedli jsme také prick-by-prick, také testování pečeného dortu (piškotový dort; dobře vařená vejce) a vařeného vejce (natvrdo; obr. 1b). Výsledky byly vyjádřeny v poměru mezi plochou alergenové pšenice a plochou exogenní histaminové pšenice(označované jako Skin Index). Navíc, pupínky získané s bílkem, hard-vařené vejce bílá, a pečené vejce, všechny byly větší než 5 mm (průměrný průměr), považovaný za spojena s vysokou specifičnost v dětství . Tyto testy ukázaly, že chlapec byl senzibilizován na více potravinových alergenů a že alergie na vejce byla stále přítomna. Pokud jde o další zjištěné senzibilizace potravin, mladý pacient uvedl, že může jíst potraviny z pšenice (chléb, těstoviny atd.), mandle, fazole a slunečnicová semena, aniž by trpěly alergickými příznaky. Prodělal mírné příznaky lip (angioedém) na občasné konzumace zeleného hrášku a lískové ořechy, vzhledem k tomu, že si nemohl vzpomenout, že někdy jedl arašídy, sépie, chobotnice, škeble, všechny druhy, což naznačuje existenci skutečné nesnášenlivosti na tyto potraviny.
In vivo a in vitro IgE detekce. kvantitativní SPT pro komerčně dostupnou řadu potravinových alergenů. Výsledky jsou vyjádřeny z hlediska indexu kůže, i.e., poměr mezi plochou alergen dolu a oblasti exogenní histaminu (10 mg/ml) odkaz dole. b kvantitativní SPT pro komerčně dostupný vaječný extrakt (vaječný bílek a žloutek) a prick-by-prick s vařeným vejcem (vaječný bílek a žloutek) a pečeným vejcem (piškotový dort). Výsledky vyjádřené z hlediska indexu kůže, také. c celkové sérum IgE a sérum IgE specifické pro vaječné alergeny, měřeno pomocí ImmunoCAP. D Kvantitativní SPT s MMR vakcínou (nezředěnou); kvantitativní intradermální testy s MMR vakcínou při ředění 1:100 a 1:10. Výsledky jsou vyjádřeny jako pšeničné plochy (mm2). Exogenní histaminu (0.002 mg/ml) byl použit pro pozitivní kontrolu v intradermální testování
Kromě toho, pomocí ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Milán), jsme hodnotili konkrétní hladina IgE v séru pro vaječný bílek, OVM, VAJÍČEK, a OVT. Zjištěné hodnoty byly prediktivní pro klinicky relevantní reakce po konzumaci vajec, což potvrdilo výsledky kožních testů (obr. 1c). Celkové hladiny IgE byly zvláště vysoké (obr. 1c).
po posouzení alergie na vejce jsme provedli SPT čistou MMR vakcínou, která se ukázala jako negativní. Poté jsme provedli intradermální testy se dvěma rostoucími ředěními vakcíny MMR (viz. 1/100, 1/10). Jak se dalo očekávat, i tento postup se ukázal jako negativní (obr. 1d). Navíc bylo subkutánně injikováno 100 µl 1/10 ředění MMR vakcíny (injekční test). Nebyla pozorována žádná okamžitá reakce, ať už lokální nebo systémová.
konečně, abychom potvrdili nepřítomnost klonů B-buněk specifických pro vakcínu, které by potvrdily výsledky získané in vivo, provedli jsme také test proliferace B-lymfocytů ex-vivo (obr. 2a–d) . Tímto přístupem byla také zkoumána možná opožděná alergická odpověď na složky vakcíny MMR (proliferace T-buněk specifických pro vakcínu). Mononukleární buňky periferní krve (PBMC) byly tedy izolovány, jak je popsáno, a obarveny karboxyfluoresceinovým sukcinimidylesterem (CFSE; 5 µM) po dobu 5 minut, promyté a kultivované v médiu Dulbecco ‚s modified Eagle‘ s medium (DMEM), doplněné 10% séra pacienta. Tyto PBMC byly vystaveny 3 různých ředění vakcíny (1/4000, 1/400, a 1/40, v tomto pořadí), ve trojím vyhotovení micro kultur (2 × 105 PBMC v 200 µl), udržována na 37 °C v 5% CO2, pára-nasycená atmosféra. Kultury bez přidání vakcíny byly použity jako negativní kontrola. Po 48 hodinách byly pbmc sklizeny, promyty a obarveny Anti-CD19 a anti-CD3 protilátkami spojenými s fluorochromem po dobu 20 minut. Po dalším promytí byly buňky analyzovány pomocí průtokové cytometrie (Navios 3L 10C, Beckman Coulter, Milán), pro detekci proliferujících B – a T-lymfocyty. Důležité je, že v přítomnosti MMR vakcíny nebyla pozorována žádná proliferace B-lymfocytů (CD19+ buňky) (obr. 2a–e). Proliferace CD3 + buněk nebyla také pozorována(údaje nejsou zobrazeny).
Ex vivo test proliferace B-buněk. Proliferace buněk hodnocená snížením intenzity CFSE: a v mikrokulturách neléčených B-buněk; b B-lymfocytů inkubovaných s 1:4000 MMR vakcíny ředění; c B-lymfocytů inkubovaných s 1:400 MMR vakcíny ředění; a konečně d B-lymfocytů inkubovaných s 1:40 MMR vakcíny ředění. Výsledky se vztahují k jednomu ze 2 provedených testů proliferace. V e stimulačních indexech pro 3 MMR ředění vakcíny výše. Průměry 2 testy. Stimulace Index je poměr mezi proliferace rychlost buňky vystaveny potenciální šíření agent a bazální rychlost šíření kontrolních buněk. Stimulační Index ≥ 2 naznačuje významnou specifickou proliferační aktivitu. SSC side scatter, CFSE carboxyfluorescein succimydil ester
na Základě této další důkaz, že jsme podávat na MMR vakcínu pro chlapce, ve dvou 50% dávky, 250 µl každého, s intervalem jedné hodiny mezi dvě injekce. Pacient zůstal pod pozorováním po dobu 1 hodiny (po druhé injekci). Podle očekávání nebyly pozorovány žádné okamžité ani opožděné nežádoucí účinky. Proto mohl být znovu přijat do školy.
o devět měsíců později byl test proliferace B-lymfocytů opakován s podobnými výsledky (obr. 2e). Poté bylo provedeno druhé podání vakcíny MMR podle stanoveného očkovacího plánu.