technika Spread plate je metoda izolace a výčtu mikroorganismů ve smíšené kultuře a rovnoměrné distribuce. Tato technika usnadňuje kvantifikaci bakterií v roztoku.
Princip Šíření Deska Technika
šíření deska technika zahrnuje použití sterilizovaných rozmetadlo s hladkým povrchem vyrobené z kovu nebo skla, aby naneste malé množství bakterie suspendovány v roztoku nad talíř. Deska musí být suchá a při pokojové teplotě, aby agar mohl snadněji absorbovat bakterie. Úspěšná spread deska bude mít počítatelný počet izolovaných bakteriálních kolonií rovnoměrně rozložených na desce.
postup techniky roztírací desky
- vytvořte ze vzorku ředicí řadu.
- napipetujte 0,1 ml z příslušné požadované série ředění na střed povrchu agarové desky.
- ponořte rozmetadlo skla ve tvaru písmene L do alkoholu.
- plamen rozmetadlo skla (hokejka) přes Bunsen hořáku.
- rozložte vzorek rovnoměrně po povrchu agaru pomocí sterilního skleněného rozmetadla a současně opatrně otáčejte Petridish pod ním.
- inkubujte destičku při 37°C po dobu 24 hodin.
- Vypočítejte hodnotu CFU vzorku. Jakmile spočítáte kolonie, vynásobte příslušným ředicím faktorem, abyste určili počet CFU / mL v původním vzorku.
Použití Techniky roztěrů
- používá se pro životaschopné deska se počítá, v nichž celkový počet jednotek tvořících kolonie na jednom talíři je vyjmenoval.
- používá se pro výpočet koncentrace buněk v trubici, ze které byl vzorek pokoven.
- spread pokovování se běžně používá v obohacování, selekce, a screeningové experimenty.
omezení techniky Spread Plate
- Strick aerobes jsou upřednostňovány, zatímco mikroaerofilní mají tendenci svítit pomaleji.
- vytlačení kolonií činí výčet obtížným.
- M. J. Pelczar
- Mackie a McCartney. Praktická Lékařská mikrobiologie
- Bailey & Scottova diagnostická mikrobiologie.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/