Pintaviljelytekniikka-periaate, menettely ja käyttö

Pintaviljelytekniikka on menetelmä, jolla mikro-organismit eristetään ja lasketaan sekaviljelmässä ja jaetaan tasaisesti. Tekniikka helpottaa bakteerien kvantifiointia liuoksessa.

Pintaviljelytekniikan periaate

pintaviljelytekniikassa käytetään steriloitua levitintä, jonka sileä pinta on valmistettu metallista tai lasista, ja levitetään pieni määrä bakteereita, jotka on ripustettu liuokseen levyn päälle. Levyn on oltava kuiva ja huoneenlämpöinen, jotta agar voi imeä bakteerit helpommin. Onnistuneella leviämislevyllä on laskettavissa oleva määrä eristettyjä bakteeripesäkkeitä tasaisesti levittäytyneenä lautaselle.

Pintaviljelytekniikka

1. tehdään laimennussarja näytteestä.
2. Pipetoidaan 0, 1 ml sopivasta laimennussarjasta agar-levyn pinnan keskelle.
3. kasta L: n muotoinen lasilevitin alkoholiin.
4. sytytä lasinlevitin (jääkiekkomaila) Bunsenpolttimen päälle.
5. näyte levitetään tasaisesti agarin pinnalle steriilillä lasilevittimellä ja samalla pyöritetään varovasti sen alla olevaa Petridissiä.
6. levyä inkuboidaan 37°C: ssa 24 tuntia.
7. lasketaan näytteen PMY-arvo. Kun pesäkkeet on laskettu, kerrotaan sopivalla laimennuskertoimella alkuperäisen näytteen PMY / mL määrän määrittämiseksi.

Pintaviljelytekniikan käyttö

1. sitä käytetään elinkelpoisten levyjen laskemiseen, jossa lasketaan pesäkkeitä muodostavien yksiköiden kokonaismäärä yhdellä levyllä.
2. sitä käytetään solujen pitoisuuden laskemiseen putkessa, josta näyte pinnoitettiin.
3. Levityspinnoitusta käytetään rutiininomaisesti rikastus -, valinta-ja seulontakokeissa.

Pintaviljelytekniikan rajoitukset

1. Strick aerobit ovat suosiossa, kun taas mikroaerofiilit pyrkivät hehkumaan hitaammin.
2. yhdyskuntien joukkoistaminen vaikeuttaa laskemista.

1. M. J. Pelczar
2. Mackie ja McCartney. Käytännön lääketieteellinen mikrobiologia
3. Bailey & Scottin diagnostinen mikrobiologia.
4. Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
5. https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
6. https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
7. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
8. https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
9. https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/