tässä yhteydessä kuvataan tapausta, jossa 15-vuotias poika, jolla on diagnosoitu vaikea muna-allergia, lähetettiin klinikallemme, koska hän ei ollut koskaan saanut MMR-rokotusta, vaikka se oli pakollinen. Siksi häntä ei voitu ottaa kouluun, edelleen. Hänen vanhempansa pitivätkin MMR-rokotusta erittäin riskialttiina, koska hänellä oli taustalla muna-allergia.
tehtiin perusteellinen allergiatutkimus.
kuten kliinisessä historiallisessa tutkimuksessa, kananmunalle on raportoitu yksi haittavaikutus, joka oli ilmennyt varhaislapsuudessa (9 kuukautta), keitetyn munan ensimmäisen nauttimisen jälkeen. Tyypillisesti oireisiin oli kuulunut hengityksen vinkumista, hengenahdistusta, äänenkorkeuden muutosta, yskää, itkua ja kalpeutta. Hengitysteiden nopea toiminta osoitti, että reaktio oli vaikea (lapsi joutui sairaalaan ja häntä hoidettiin kortikosteroideilla ja antihistamiineilla). Tämän tapahtuman jälkeen munat suljettiin kokonaan pois lasten ruokavaliosta. Lisäksi lapsi sai 9-vuotiaana anafylaktisen sokin pinjansiemenien nauttimisen jälkeen.
kvantitatiiviset saumattomat rauta-ja teräsputket tehtiin 36 kaupallisesti saatavilla olevan ruoka-aineallergeenin joukolla (Lofarma, Milano, Italia), mikä kuvastaa ruoka-allergian kirjoa Etelä-Italiassa (jossa ihmiset käyttävät tyypillistä Välimeren ruokavaliota). Useita herkistymisiä havaittiin muun muassa maapähkinöissä, manteleissa, hasselpähkinöissä, vehnässä ja erityisesti munanvalkuaisessa (viikuna. 1 A). Suoritimme myös prick-by-prick-testin, jossa testattiin myös paistettu kakku (sienikakku; hyvin keitetyt munat) ja keitetty muna (kovaksi keitetty; viikuna. 1b). Tulokset ilmaistiin allergeenin whealin alueen ja eksogeenisen histamiinin whealin alueen (Ihoindeksi) välisenä suhteena. Lisäksi munanvalkuaisella, kovaksi keitetyllä munanvalkuaisella ja paistetulla munalla saadut vehnäpyörykät olivat kaikki yli 5 mm (keskimääräinen halkaisija), ja niiden katsottiin liittyvän lapsuudessa suureen spesifisyyteen . Testit osoittivat, että poika oli herkistynyt useille ruoka-aineallergeeneille ja että muna-allergiaa oli edelleen. Mitä muihin havaittuihin ruoka-aineherkkyyksiin tulee, nuori potilas kertoi voivansa syödä vehnäpohjaisia ruokia (leipää, pastaa jne.), mantelit, pavut ja auringonkukansiemenet ilman allergiaoireita. Hän oli saanut lieviä oireita (huuli angioedeema) nautittuaan silloin tällöin vihreitä herneitä ja hasselpähkinöitä, kun taas hän ei muistanut koskaan syöneensä maapähkinöitä, seepioita, mustekaloja ja simpukoita, mitä tahansa, mikä viittasi todelliseen suvaitsemattomuuteen näitä elintarvikkeita kohtaan.
in vivo ja in vitro Ige-toteaminen. määrälliset saumattomat rauta-ja teräsputket kaupallisesti saatavilla oleville ruoka-aineallergeeneille. Tulokset ilmaistaan Skin-indeksinä, i.e.allergeenikertoimen alueen ja eksogeenisen histamiinin (10 mg/ml) vertailukertoimen alueen välinen suhde. b kvantitatiivinen SPT kaupallisesti saatavilla olevalle munauutteelle (munanvalkuainen ja keltuainen) ja prick-by-prick keitetyn munan (munanvalkuainen ja keltuainen) ja paistetun munan (sienikakku) kanssa. Tulokset ilmaistuna ihon indeksinä, myös. c seerumin kokonais-IgE ja muna-allergeenispesifinen seerumin IgE, mitattuna Immunokapilla. d kvantitatiivinen SPT yhdessä MMR-rokotteen kanssa (laimentamaton); kvantitatiivinen intradermaalinen testi MMR-rokotteella, laimennokset 1:100 ja 1:10. Tulokset ilmoitetaan wheal-alueina (mm2). Ihonsisäisessä testissä käytettiin positiivista histamiinia (0, 002 mg/ml)
lisäksi ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Milano) arvioi seerumin IgE-tason munanvalkuaiselle, OVM: lle, OVA: lle ja OVT: lle. Havaitut arvot ennustivat kliinisesti merkittäviä reaktioita munasolujen nauttimisen jälkeen ja vahvistivat ihotestitulokset (Kuva. 1c). IgE: n kokonaispitoisuudet olivat erityisen korkeat (Kuva. 1c).
arvioituamme muna-allergian teimme SPT: n puhtaalla MMR-rokotteella, joka osoittautui negatiiviseksi. Sitten teimme ihonsisäisiä testejä kahdella lisääntyvällä MMR-rokotteen laimennoksella (viz. 1/100, 1/10). Odotetusti myös tämä menettely osoittautui negatiiviseksi (Kuva. 1d). Lisäksi 100 µl 1/10 laimennettua MMR-rokotetta pistettiin ihon alle (injektiotesti). Välitöntä, paikallista tai systeemistä reaktiota ei havaittu.
lopuksi, varmistaaksemme, että rokotteelle spesifisiä B-soluklooneja ei ole, mikä vahvistaisi in vivo saadut tulokset, suoritimme myös ex-vivo B-lymfosyyttien proliferaatiomäärityksen (Kuva. 2a-d) . Tällä lähestymistavalla tutkittiin myös mahdollista viivästynyttä allergista vastetta MMR – rokotteen komponentteihin (rokotteelle spesifisten T-solujen proliferaatio). Näin perifeerisen veren mononukleaarisolut (pbmc) eristettiin kuvatulla tavalla ja värjättiin karboksifluoreskeiinisukkinimidyyliesterillä (CFSE; 5 µM) 5 minuutin ajan, pestään ja viljellään dulbeccon modifioidulla Eagle ’ s mediumilla (dmem), johon lisätään 10% potilaan seerumista. Nämä PBMC: t altistettiin 3 erilaiselle rokotteen laimennokselle (1 / 4000, 1 / 400 ja 1 / 40) kolmikantaisissa mikroviljelmissä (2 × 105 PBMC 200 µl: ssa), joita säilytettiin 37 °C: n lämpötilassa 5%: n CO2: n höyryn kyllästämässä ilmakehässä. Negatiivisena kontrollina käytettiin viljelmiä, joihin ei lisätty rokotetta. 48 tunnin kuluttua PBMC kerättiin, pestiin ja värjättiin fluorokromiin kytketyillä anti-CD19-ja anti-CD3-vasta-aineilla 20 minuutin ajan. Lisäpesun jälkeen solut analysoitiin virtaussytometrialla (Navios 3L 10c, Beckman Coulter, Milan) jakautuvien B – ja T-lymfosyyttien havaitsemiseksi. Tärkeää on, että MMR-rokotteen yhteydessä ei havaittu B-lymfosyyttien proliferaatiota (CD19+ – soluja) (Kuva. 2a-e). CD3 + – solujen proliferaatiota ei myöskään havaittu (tietoja ei näy).
Ex vivo-B-solujen proliferaatiokoe. Solujen proliferaatio arvioituna CFE-intensiteetin vähenemisellä: a käsittelemättömien B-solujen mikrokulttuureissa; B-lymfosyyttejä inkuboidaan 1:4000 MMR:n rokotelaimennoksella, c-B-lymfosyyttejä inkuboidaan 1: 400 MMR: n rokotelaimennoksella ja lopuksi D-B-lymfosyyttejä inkuboidaan 1: 40 MMR: n rokotelaimennoksella. Tulokset viittaavat yhteen suoritetuista kahdesta proliferaatio-määrityksestä. Edellä mainittujen 3 MMR: n rokotelaimennosten Stimulaatioindekseissä. Kahden määrityksen keskiarvot. Stimulaatioindeksi on mahdolliselle proliferaatioaineelle altistuneiden solujen proliferaationopeuden ja verrokkisolujen tyviproliferaationopeuden välinen suhde. Stimulaatioindeksi ≥ 2 viittaa merkittävään spesifiseen proliferaatioaktiivisuuteen. SSC side scatter, CFSE karboksifluoreseiinisukkimydiiliesteri
tämän lisänäytön perusteella annoimme MMR-rokotteen pojalle kahtena 50%: n annoksena, 250 µl kumpaankin, yhden tunnin välein näiden kahden injektion välillä. Potilasta tarkkailtiin 1 tunnin ajan (toisen injektion jälkeen). Kuten odotettiin, välittömiä tai viivästyneitä haittavaikutuksia ei havaittu. Siksi hänet voitiin ottaa takaisin kouluun.
yhdeksän kuukautta myöhemmin B-lymfosyyttien proliferaatiokoe toistettiin samanlaisin tuloksin (Kuva. 2 e). Tämän jälkeen annettiin toinen MMR-rokote annetun rokotusohjelman mukaisesti.