2 R6/2 transzgenikus egér
az R6 vonalat Gill Bates laboratóriumaiban fejlesztették ki egy 1,9 kb-os sacl-EcoRI fragmens pronukleáris injekciójából, a HD betegből származó humán HD gén 5′ végét felhasználva. Ez áll a következők közül: 1 kb 5 ‘ UTR szekvenciák, exon 1 hordozó Cag ismétlődik a 130 egység, és az első 262 bp intron 1. Az R6 / 2 vonal volt a HD első transzgenikus egérmodellje. Csúcsmérete 144-150 ismétlődő egység az 1. exonban (Mangiarini et al., 1996). Ez a HD egyik legszélesebb körben alkalmazott genetikai modellje. Az R6/2 modell progresszív homogén HD-szerű fenotípust mutat, a túlélés 14-21 hét között mozog, a lakhatási és a létesítmény körülményeitől függően. A túlélés időtartamának különbségei más tényezők mellett az elhelyezés, a kezelés, a környezet dúsulása, valamint a vírusos és bakteriális szimbiózisok megengedett jelenlétének következményei lehetnek. Tekintettel arra, hogy a dúsított környezetek megváltoztathatják a viselkedési fenotípus progresszióját R6 / 2 egerekben (Hannan, 2004), magától értetődik, hogy a laboratóriumok közötti különbségek megváltoztathatják az R6/2 fenotípust. A kereskedelmi vivaria-ban jelenleg elérhető R6 / 2 egerek Cag ismétlése sokkal alacsonyabb, mint a kísérleti vizsgálatokban korábban használtaké. A fenti kérdések előírják, hogy az R6/2 egerek bármely kolóniáján belül a CAG ismétlődési mérete kritikus minden eredmény szempontjából, és a túlélés megismételhető mérése és más fenotípusos eredménymérők kiemelkedőek minden egymást követő “f” generáció számára, összehasonlítva más vizsgálatokkal.
viselkedési elemzések az R6/2 egér showage kapcsolatos károsodások dystonic mozgások, motoros teljesítmény, markolat erejét, és a testsúly, hogy fokozatosan romlik, amíg a halál. Az R6 / 2 egerek hajlamosak a görcsrohamokra (status epilepticus) és a hirtelen halálra, különösen a betegség végstádiumában, bár a görcsrohamok már 60 napon belül előfordulhatnak. A túlterhelés és más stresszorok súlyosbítják a rohamot. A neuropatológiai következmények, amelyek magukban foglalják az agy súlyának növekvő jelentős csökkenését, 30 naptól vannak jelen, míg a csökkent agytérfogat és a hiperventrikuláris megnagyobbodás 60 naptól van jelen, mindkettő az emberi betegség jellemzője. Emellett a neostriatal térfogat csökkenése, a striatális neuron atrófia, a megnövekedett asztrogliózis és a striatális neuronszám csökkenése 90 napos korban jelen van (Stack et al., 2005). Ezen túlmenően, összhangban a korai felnőttkori HD-vel, az enkefalin striatális neuronok csökkentek a substance-P striatális vetület neuronokhoz képest (Sun et al., 2002) az enkefalin és a substance-P striatonigral vetületek azonos megőrzésével. A Huntingtin-pozitív aggregátumok a születés utáni 1. napon vannak jelen, számuk és méretük az életkor előrehaladtával növekszik, ami arra utal, hogy a betegség kialakulása és progressziója a klinikai jelenségek jelenléte előtt következik be (Stack et al., 2005). A huntingtin zárványok kiterjedtek és nagy számban találhatók az agyban, ez a jelenség nincs összhangban a HD betegeknél megfigyeltekkel. Felvetődött, hogy ez utóbbi a HD génnek csak egy részének, a transzgénhatásoknak és/vagy az expressziós szintet növelő idegen promoterek használatának eredménye lehet. Úgy tűnik, hogy a kóros fenotípusban nincs nemi különbség. Párhuzamosság van a HD betegeknél megfigyelt betegség patogenezisének jelentett mechanizmusai és az R6/2 egerekben talált mechanizmusok között, amelyek magukban foglalják a megváltozott proteolízist és proteoszomális aktivitást, a megnövekedett fehérje térhálósodást, az indukált chaperone expressziót és a létfontosságú sejtfolyamatok hibáit, amelyek magukban foglalják az endocitózist, az intraneuronális kereskedelmet, a transzkripciós szabályozást, a posztszinaptikus jelátvitelt, az apoptotikus kaszkádokat, valamint a bioenergetikai metabolizmus és a mitokondriális funkció megváltozását (Beal and Ferrante, 2004; Ryu et al., 2005; Stack and Ferrante, 2007). Míg az R6 / 2 modell számos klinikai és neuropatológiai jellemzővel rendelkezik a HD betegeknél, ez nem pontos genetikai és neuropatológiai egyezés a HD betegekkel. Mindazonáltal az R6 / 2 modell jól jellemzett progresszív fenotípussal rendelkezik, mérsékelt variabilitással, így a kísérleti csoportok akár 10 egeret is tartalmazhatnak, és képesek kimutatni a különbségeket számos eredménymérőben. Lehetőség van túlélési vizsgálatok elvégzésére, amely a neuroprotekció fontos potenciális helyettesítő mutatója, a születéstől számított körülbelül 3 hónap alatt. Az R6/2 egerek hatékonysága és egyértelmű kísérleti végpontjai továbbra is jelentős előnyt jelentenek.
a fenotípus megjelenésében nagy variabilitás lehet, amely a CAG ismétlési méretétől függ. A Cag ismétlések száma az R6/2 sorban 148-153, 500-550 bp-vel, PCR-analízissel meghatározva (Stack et al., 2005). A >550 bázispárok megnövekedett száma az R6/2 fenotípus súlyosságának mérséklődését eredményezi. Az alappárok számának növekedésével egyidejűleg növekszik a CAG ismétlési mérete. A 600 és 800 közötti bázispárok Cag ismétlési mérete 175 és 192 között van az R6/2 egerekben, és az átlagos túlélési kiterjesztés jelentősen megnő körülbelül 131 napra, szemben az 500-550 bp-vel 98 nap alatt. Az 1000-es vagy annál magasabb bázispárok Cag ismétlési méretei következetesen 200 felett vannak, átlagos túlélésük 148 nap. A túlélés variabilitása és a viselkedési és neuropatológiai fenotípus javulása a megnövekedett bázispárszámmal és Cag ismétlődési mérettel rendelkező R6 / 2 egerekben csökkentheti azok hasznosságát a terápiás vizsgálatokban, és megzavarhatja a kísérleti eredményeket (Stack et al., 2005). Bár a klinikai intézkedések nagy variabilitása gyakori az emberi vizsgálatokban, a mérési variabilitás minimalizálása növeli a különbségek kimutatásának képességét, különösen egér gyógyszerkísérletekben. Így az ezeket az egereket használó laboratóriumoknak biztosítaniuk kell a genetikai variabilitás csökkentését, viszonylag homogén egérpopulációt biztosítva a kísérleti kohorszokon belül.