ここでは、重度の卵アレルギーと診断された15歳の少年の症例について説明します。 したがって、彼はさらに学校に入学することができませんでした。 確かに、彼の両親は、彼の根底にある卵アレルギーのためにMMRワクチン接種は非常に危険であると考えていました。
徹底的なアレルギー学的調査が行われた。
臨床歴については、卵に対する単一の有害反応が報告されており、これは調理された卵の最初の摂取後、幼児期初期（9ヶ月）に発生した。 典型的には、症状には喘鳴、呼吸困難、声の高さの変化、咳、叫び声、および蒼白が含まれていた。 気道の急速な関与は、反応が重度であることを示した（子供は入院し、コルチコステロイドおよび抗ヒスタミン薬で治療された）。 このイベントの後、卵は子供の食事から完全に除外されました。 さらに、子供が9歳のとき、彼は松の実を摂取した後、アナフィラキシーショックに苦しんだ。
定量的SPTは、（人々が典型的な地中海の食事を消費する）南イタリアの食物アレルギーのスペクトルを反映して、36の市販の食物アレルゲン（Lofarma、ミラノ、イタリア）の配列を用いて行われた。 ピーナッツ、アーモンド、ヘーゼルナッツ、小麦、特に卵白を含む複数の感作が検出された（図10）。 1a）。 また、焼きたてのケーキ（スポンジケーキ、よく調理された卵）と調理された卵（ハードボイルド、図）をテストし、プリックバイプリックを行いました。 1b）。 結果はアレルゲンホイールの面積と外因性ヒスタミンホイールの面積との比で表された（皮膚指数と呼ばれる）。 さらに、卵白、固ゆで卵白、および焼いた卵で得られた小麦は、すべて5mm（平均直径）を超えており、小児期の高い特異性に関連していると考えられていた。 これらの検査は，少年が複数の食物アレルゲンに感作され，卵アレルギーがまだ存在していることを示した。 検出された他の食品感作については、若い患者は小麦由来の食品（パン、パスタなど）を食べることができると述べた。）、アーモンド、豆、およびヒマワリの種、アレルギーの徴候に苦しまないで。 彼はグリーンピースとヘーゼルナッツの時折の消費時にささやかな症状（唇血管浮腫）を受けていたが、ピーナッツ、イカ、タコ、アサリを食べたことを覚えていないので、これらの食品に対する本物の不耐性の存在を示唆している。
In vivoおよびin vitro IgE検出。 食品アレルゲンの市販の配列のための定量的なSPT。 結果は皮の索引、iの点では表現されます。e.、アレルゲンのwhealの区域と外因性ヒスタミンの区域間の比率（10のmg/ml）はwhealを参照します。 市販の卵抽出物（卵白および卵黄）、および調理された卵（卵白および卵黄）、および焼き卵（スポンジケーキ）によるプリックバイプリックのための定量的SPT。 結果はまた皮の索引の点では、表現しました。 Ｉｍｍｕｎｏｃａｐによって測定した、総血清Ｉｇｅおよび卵アレルゲン特異的血清Ｉｇｅ。 D MMRワクチンによる定量的SPT（希釈されていない）;MMRワクチンによる定量的な皮内試験、それぞれ1:100および1:10希釈で。 結果は、ウィール面積（mm2）として表されます。 外因性ヒスタミン（0.002mg/ml）は皮内テストで肯定的な制御のために使用されました
さらに、Ｉｍｍｕｎｏｃａｐ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｍｉｌａｎ）により、卵白、ＯＶＭ、ＯＶＡ、およびＯＶＴについて血清中の特異的Ｉｇｅレベルを評価した。 検出された値は、卵消費後の臨床的に関連する反応を予測し、皮膚試験結果を確認した（図１ ０Ａ）。 1c）。 総Ｉｇｅレベルは特に高かった（図１Ｂ）。 1c）。
卵アレルギーを評価し、純粋なMMRワクチンでSPTを行い、陰性であることが判明しました。 次に，ＭＭＲワクチンの二つの希釈を増加させた皮内試験を行った（すなわち，ＭＭＲワクチンの二つの希釈を増加させた皮内試験を行った。 1/100, 1/10). 予想されるように、この手順もまた陰性であることが判明した（図４）。 1d）。 さらに、１ ０ ０μ ｌのＭＭＲワクチンの１／１ ０希釈液を皮下注射した（注射試験）。 局所的または全身的のいずれの即時反応も観察されなかった。
最後に、in vivoで得られた結果を裏付けるワクチン特異的B細胞クローンの不在を確認するために、ex-vivo Bリンパ球増殖アッセイも行った（図。 2a-d–。 このアプローチによって、MMRワクチン成分に対する可能性のある遅延アレルギー応答も調べた（ワクチン特異的T細胞の増殖）。 したがって、末梢血単核細胞（PBMC）は、記載されているように単離され、カルボキシフルオレセインスクシニミジルエステル（CFSE）で染色された; ５μ Ｍ）を５分間、洗浄し、１ ０％の患者血清を補充したＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）中で培養した。 これらのＰＢＭＣを、３つの異なる希釈液（それぞれ１／４ ０ ０ ０、１／４ ０ ０、および１／４ ０）に、５％ＣＯ２の蒸気飽和雰囲気中で３ ７℃に維持された３つの微小培養物（２ ０ ０μ ｌ中の２×１ ０ ５ＰＢＭＣ）中で ワクチン添加のない培養物を陰性対照として使用した。 ４ ８時間後、ＰＢＭＣを回収し、洗浄し、蛍光色素結合抗ＣＤ１ ９抗体および抗ＣＤ３抗体で２ ０分間染色した。 さらに洗浄した後、細胞を、増殖するＢリンパ球およびＴリンパ球の検出のために、フローサイトメトリー（Navios3L10C,Beckman Coulter,Milan）によって分析した。 重要なことに、Ｂリンパ球増殖（ＣＤ１ ９＋細胞）は、ＭＭＲワクチンの存在下では観察されなかった（図１ ０Ａ）。 2a-e）。 ＣＤ３＋細胞増殖もまた観察されなかった（データは示されていない）。
Ex vivo B細胞増殖アッセイ。 CFSE強度の低下によって評価される細胞増殖：未処理のB細胞の微小培養におけるa; ｂ−リンパ球を１：４ ０ ０ ０ｍｍｒワクチン希釈でインキュベートした；ｃ−リンパ球を１：４ ０ ０ＭＭＲワクチン希釈でインキュベートした；そして最後に、ｄ−リンパ球を１：４ ０ＭＭＲワクチン希釈でインキュベートした。 結果は、実施された2つの増殖アッセイのいずれかを指す。 上記の3つのMMRワクチン希釈のためのe刺激指数で。 2つの試金の平均。 刺激指数は、潜在的な増殖剤に曝露された細胞の増殖速度と対照細胞の基底増殖速度との間の比である。 刺激指数≥2は、有意な特異的増殖活性を示す。 SSC側散乱、CFSEカルボキシフルオレセインスクシミジルエステル
このさらなる証拠に基づいて、我々は、2回の注射の間に1時間の間隔で、2回の50％用量、それぞれ250μ Lで、MMRワクチンを少年に投与した。 患者は1時間（2回目の注射後）の観察下にとどまった。 予想されるように、即時または遅延の有害反応は観察されなかった。 したがって、彼は学校に再入院することができました。＜５ ３ ６ ６＞＜１ ２ ０ ０＞９ヶ月後、Ｂリンパ球増殖アッセイを同様の結果で繰り返した（図１ ２）。 2e）。 次に、指定された接種スケジュールに従って、第２のＭＭＲワクチン投与を実施した。