放射性免疫測定

古典的には、放射性免疫測定を行うために、既知の量の抗原を、チロシンに結合した125-Iなどのヨウ素のガンマ放射性同位体でラベ 次いで、この放射性標識された抗原を、その抗原に対する既知量の抗体と混合し、その結果、この2つは互いに特異的に結合する。 次いで、その同じ抗原の未知の量を含む患者からの血清のサンプルが添加される。 これにより、血清からの標識されていない(または「冷たい」)抗原が、抗体結合部位について放射標識抗原(「熱い」)と競合するようになる。 「冷たい」抗原の濃度が増加するにつれて、その多くが抗体に結合し、放射標識された変異体を置換し、抗体結合放射標識された抗原の遊離放射標識された抗原に対する比率を減少させる。 次いで、結合した抗原を分離し、上清中に残っている遊離(非結合)抗原の放射能をガンマカウンターを用いて測定する。

この方法は、原則として任意の生体分子に使用することができ、血清抗原に限定されるものではなく、捕捉された抗原を直接測定するのではなく、遊離抗原を測定する間接的な方法を使用する必要もない。 特定の実施形態では、本発明は、PRO2 2 4、PRO9 7 8 3、PRO1 1 0 8、PRO3 4 0 0 0、PRO2 4 0、PRO9 4 3、huA3 3、PRO2 3 0、PRO1 7 8、PRO1 1 9 9、PRO4 3 3 3、PRO1 3 3 6、PRO1 9 5 9 8、PRO1 0 8 3、huTRPM2又はPRO1 8 0 1産物は薬学的に許容される塩であり、PRO2 2 4、PRO9 7 8 3、 一方の抗体は上記のように放射性標識され、他方の抗体は未修飾のままである。 RIAは、「冷たい」非標識抗体が溶液中で標的分子と相互作用して結合することを可能にすることから始まる。 好ましくは、この非標識抗体は、アガロースビーズに結合され、表面に被覆されるなど、何らかの方法で固定化される。 次に、「熱い」放射性標識抗体を、第1の抗体−標的分子複合体と相互作用させる。 広範な洗浄の後、結合した放射性抗体の直接量が測定され、標的分子の量が同時にアッセイされた基準量と比較することによって定量される。 この方法は、原理的には非放射性サンドイッチELISA法と同様である。

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