結果と考察
PCR-RFLP解析は、in silico解析と互換性のある制限パターンを明らかにした。 尾の奇形を有するすべての犬は同じパターン（3つの断片、2つの可視バンド）を提示し、これは正常な尾を有する犬によって提示されたもの（2つの断片、1つの可視バンド）とは異なっていた（図2）。1). また、ＰＣＲ−ＲＦＬＰに基づく別のアッセイを、ポリアクリルアミドゲル電気泳動システムを使用して、イヌのＴ遺伝子における同じ変異を同定するために成功裏に使用された（Ｇｒｕｓｚｃｚｙｎｓｋａ＜１ ４ ４ ７＞Ｃｚａｐｌａ２ ０ １ １）。 ポリアクリルアミドゲル電気泳動の性能は，ＤＮＡ断片に対するバンドの分解能を改善することができた。 しかし、このシステムはより面倒であるため、実用性は低下するであろう。 本研究では，消化後に生成されたＤＮＡ断片をすべて可視化することはできなかったが，アガロースゲル電気泳動を用いて遺伝子型を容易に区別することができた。
図1.1.1.1. C189G変異の検出のためのPCR-RFLP。 塩基対（M）のマーカー、影響を受けた犬-短い尾（1-7）と正常な尾を持つ動物（8）。
配列されたサンプルの分析では、ヘテロ接合性C(シトシン)G(グアニン)ヌクレオチド189エクソン1尾奇形を持つ犬でのみ観察されました。 突然変異の位置は、Ｇｅｎｂａｎｋで入手可能なＴ遺伝子ｍ ＲＮＡ配列（受託番号：ＡＪ２ ４ ５ ５ １ ３）に基づいていた。
in silico分析では、イソロイシンからメチオニンへのアミノ酸63の変化も観察された。 本研究で得られた全てのＤＮＡ配列を、受託番号：ＭＦ４ ９ ５ ４ ８ ８（短尾）、ＭＦ４ ９ ５ ４ ８ ９（尾部の不在）、ＭＦ４ ９ ５ ４ ９ ０（尾部の不在）およびＭＦ４ ９ ５ ４ ９ １（正常尾部）でＧｅｎｂａｎｋに寄託した。
現在の状態（尾部奇形を有する動物のCG）では一つの遺伝子型しか発見されなかったが、影響を受けた犬では表現型の変化が観察され、これは尾部の大きさである。 いくつかの動物は短い尾（約3-4椎骨）を提示し、他の動物は尾（約1-2椎骨）の欠如を示した（図。2). 同様の表現型もHaworthらによって観察された。 （2001年）-“犬”でデビュー。 これについての説明は犬ではまだ知られていないが、Buckingham et al. (2013)は、猫の先天性尾のサイズの変化を研究し、T遺伝子の複数の突然変異によって引き起こされるハプロイン不全の証拠を発見した。 Ｃ．１ １ ９ ９ｄｅｌｃ、ｃ．１ １ ６ ９ｄｅｌｃおよびｃ．９ ９ ８ｄｅｌｔ変異は、異なるレベルの遺伝子発現に関連しており、これは、尾部奇形を有するイヌ間の異なる表現型を説明することができ 2013).
図1.1.1.2. （Ａ）Ｔ遺伝子に突然変異Ｃ１ ８ ９Ｇを担持する犬。 （B）C189G変異のない同じリターからの犬。
変異の遺伝的特徴は、遺伝像分析によって証明することができる（図。研究されたごみの3）。 変異が常染色体優性遺伝パターンを有することを確認することができた。 しかしながら、本研究では優性ホモ接合（Ｇ Ｇ）遺伝子型は見出されず、ホモ接合では、変異Ｔ遺伝子が胎児死を引き起こすという観察を補強する（Ｈａｗｏｒｔｈ ｅ ｔ ａ ｌ． 2001). Hytonen et al. (2009)は、正常尾動物間の交雑からの同腹（CC遺伝子型）が、不正な尾動物間の交雑からの同腹（CG遺伝子型）よりも29％大きいことを観察した。 この結果は、致命的な対立遺伝子を含む交雑からの子孫における25％の予想される減少と互換性がある。
図1.1.1.3. ラブラドール-レトリーバーのT遺伝子におけるC189G変異の遺伝パターンを示す遺伝図。 母方の祖父母との交配（ｉ），患犬のリターと正常な雄との交配（Ｉ Ｉ）およびリターとの交配（ＩＩＩ）を分析した。
T遺伝子の変異は、マウスやネコなどの他の種の尾部奇形と関連している(Wilson et al. 1995,Buckingham et al. 2013). そして、そのうちのいくつかでは、猫の尿失禁および糞便失禁（Robinson1993）のような他の変化も観察される。 しかしながら、イヌでは、今日まで、ヘテロ接合動物（ＣＧ）において尾部奇形のみが観察されている（Ｉｎｄｒｅｂｏ ｅ ｔ ａ ｌ． 2008). いくつかの犬種では、「尾の奇形」表現型はC189G変異（Boston Terrier、English Bulldog、King Charles Spaniel、Miniature Schnauzer、Parson Russell Terrier、およびRottweiler）と関連していなかったが、影響を受けた多数の品種は古代の変異を示唆している（Hytonen et al. 2009）、多くの品種の形成前に先祖の犬に存在しています。 しかし、CGヘテロ接合動物は性欲や生殖能力の変化を持たないように見えるため、異人種間の交雑も突然変異の拡散に寄与している可能性があります。 突然変異の拡散に寄与したかもしれないもう一つの要因は審美的な尾頭切除がまだ許可されていたときに尾のない犬の再生の使用でした。 この時期、いくつかの品種では尾の欠如が望ましく、突然変異の拡散に寄与しているため、尾の無形成を有する多くの動物が再現体として使用されて
現在、尾部切除術（外科的尾部除去）の実践は、欧州連合やブラジルのような世界のいくつかの国で禁止されている手順です（Haworth et al. 2001年、CFMV2013）。 いくつかの欧州連合諸国では、T遺伝子のC189G変異を同定するための遺伝子検査は、いくつかの品種の尾の不在が先天性起源であるか、動物が不規則な外科的処置を受けたかどうかを確認するために使用される。 本研究で使用されたＰＣＲ-ＲＦＬＰは，この変異を同定するための簡単で正確な技術であり，違法な尾頭切除術の練習を同定するための証拠として使用することができた。
犬のT遺伝子のC189G変異に関する情報が不足しているため、他の形態学的または生理学的特性との関連に関するさらなる情報はないため、調査す