고전적으로,방사성 면역 분석을 수행하기 위해 알려진 양의 항원은 티로신에 부착 된 125-1 과 같은 요오드의 감마 방사성 동위 원소로 라벨링하여 방사성으로 만들어집니다. 이 방사성 표지 된 항원은 그 항원에 대한 알려진 양의 항체와 혼합되고,그 결과,두 사람은 서로 구체적으로 결합한다. 그런 다음 동일한 항원의 알 수없는 양을 함유 한 환자의 혈청 샘플을 추가합니다. 이것은 혈청으로부터의 라벨링되지 않은(또는”차가운”)항원이 항체 결합 부위에 대해 방사성 라벨링 된 항원(“뜨거운”)과 경쟁하게 만든다. “차가운”항원의 농도가 증가함에 따라,그것의 더 많은 것이 항체에 결합하여,방사성 표지 된 변이를 대체하고,항체 결합 된 방사성 표지 된 항원이 자유 방사성 표지 된 항원에 대한 비율을 감소시킨다. 그런 다음 결합된 항원을 분리하고 상등액에 남아있는 자유(결합되지 않은)항원의 방사능을 감마 카운터를 사용하여 측정합니다.
이 방법은 원칙적으로 모든 생물학적 분자에 사용할 수 있으며 혈청 항원에 국한되지 않으며 포획 된 항원을 직접 측정하는 대신 유리 항원을 측정하는 간접적 인 방법을 사용할 필요가 없습니다. 예를 들어,관심 있는 항원 또는 표적 분자를 방사성 표지하는 것이 바람직하지 않거나 가능하지 않은 경우,표적을 인식하는 2 개의 상이한 항체가 이용가능하고 표적이 항체에 다수의 에피토프를 제시하기에 충분히 큰 경우(예를 들어,단백질)리아가 수행될 수 있다. 하나의 항체는 위와 같이 방사성 표지 될 것이고 다른 항체는 수정되지 않은 채로 남아있을 것이다. 리아는”차가운”라벨이없는 항체가 용액에서 표적 분자에 상호 작용하고 결합 할 수있게되면서 시작될 것입니다. 바람직하게는,이 라벨링되지 않은 항체는 아가로오스 비드에 결합,표면에 코팅 등과 같은 어떤 방식으로 고정화된다. 다음으로,”뜨거운”방사성 표지 된 항체는 첫 번째 항체-표적 분자 복합체와 상호 작용할 수있다. 광범위한 세척 후,결합된 방사성 항체의 직접량을 측정하고,동시에 분석된 기준량과 비교하여 표적 분자의 양을 정량화한다. 이 방법은 원칙적으로 비 방사성 샌드위치 엘리사 방법과 유사합니다.