2-디 전기 영동 첫 번째 차원에서 전기 영동으로 시작한 다음 분자를 첫 번째와 수직으로 분리하여 두 번째 차원에서 전기 페로 그램을 만듭니다. 첫번째 차원에 있는 전기 이동법에서는,분자는 그들의 등전점에 따라 선형으로 분리됩니다. 두 번째 차원에서 분자는 분자 질량에 따라 첫 번째 전기 페로 그램으로부터 90 도에서 분리됩니다. 2 개의 분자가 2 개의 명백한 재산에서 유사할 확률이 낮기 때문에,분자는 1 차원 전기 이동법에서 보다는 2 차원 전기 이동법에서 더 효과적으로 분리됩니다.
이 기술을 사용하여 단백질이 분리되는 2 차원은 등전점,네이티브 상태의 단백질 복합 질량 또는 단백질 질량 일 수 있습니다.
등전점에 의한 단백질의 분리를 등전점 포커싱이라고 한다. 따라서,산도 그라데이션 겔에 적용 되 고 전기 전위는 겔에 걸쳐 적용,다른 보다 더 긍정적인 한쪽 끝을 만들기. 그들의 등전점 이외의 모든 산도 값에서,단백질은 충전 될 것이다. 그들이 긍정적으로 위탁되는 경우에,젤의 부정적인 끝으로 당겨지고 음으로 위탁되는 경우에 젤의 긍정적인 끝에 당겨질 것입니다. 첫 번째 차원에 적용된 단백질은 겔을 따라 이동하고 등전점에 축적됩니다;즉,단백질의 전체 전하가 0 인 지점(중성 전하).
세포에서 단백질의 기능 분석을 위해서는 그들의 협력에 대한 지식이 필수적입니다. 대부분의 경우 단백질은 완전히 기능하기 위해 복합체에서 함께 작용합니다. 세포의이 하위 소기관 조직의 분석 단백질 복합체의 기본 상태를 보존 하는 기술이 필요 합니다. 네이티브 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동(네이티브 페이지)에서 단백질은 네이티브 상태로 유지되며 질량 및 복합체의 질량에 따라 전기장에서 분리됩니다. 순 전하가 아닌 크기 별 분리를 얻기 위해 쿠마시에 브릴리언트 블루 또는 리튬 도데 실 설페이트를 사용하여 추가 전하가 단백질로 전달됩니다. 첫번째 차원의 완료 후에 복합물은 그들의 질량에 의해 분리되는 복합물로 구성되는 단백질이 두번째 차원에 있는 변성 성대 페이지를 적용해서 파괴됩니다.
단백질을 질량으로 분리하기 전에,이들은 다른 시약과 함께 나트륨 도데 실 설페이트로 처리된다. 이것은 단백질을 변성시킵니다(즉,단백질을 길고 직선 인 분자로 펼칩니다). 단백질의 길이(펼쳐질 때)는 질량에 대략 비례하기 때문에,이것은 단백질의 질량에 대략 비례하는 많은 분자를 붙인다는 것과 같습니다. 분자가 음전하를 띠기 때문에,이 결과는 모든 단백질이 서로 거의 동일한 질량 대 전하 비율을 갖게된다는 것입니다. 또한,전하가 없을 때(등전 포커싱 단계의 결과)단백질이 이동되지 않기 때문에,전하(음전하)에서 단백질의 코팅은 2 차원에서의 단백질의 이동을 허용한다(전하-페이지,1 차원에서의 사용은 양립할 수 없고,비이온성 또는 양이온성 세제를 사용해야 한다).2 차원에서는 전위가 다시 적용되지만,1 차원으로부터 90 도 각도로 적용된다. 단백질은 질량 대 충전 비율에 비례하여 젤의 더 긍정적 인 측면에 끌릴 것입니다(왜냐하면 질량은 음전하를 띠기 때문입니다). 앞서 설명한 바와 같이,이 비율은 모든 단백질에 대해 거의 동일 할 것입니다. 단백질의 진행은 마찰력에 의해 느려질 것입니다. 현재가 적용될 때 젤은 분자체 같이 그러므로 행동해,체를 통과하고 젤의 더 낮은 지구를 도달할 수 있는 젤 및 더 작은 단백질에서 높이 유지되는 더 큰 단백질을 가진 그들의 분자량을 기준으로 하여 단백질을 분리하.