Herved beskriver vi tilfellet med en 15 år gammel gutt, diagnostisert med alvorlig egg allergi, som ble henvist til Vår Klinikk fordi han aldri hadde fått MMR vaksinasjon, til tross for at det var obligatorisk. Derfor kunne han ikke bli tatt opp i skolen, videre. Faktisk, hans foreldre anses mmr vaksinasjon svært risikabelt på grunn av hans underliggende egg allergi.
en grundig allergologisk undersøkelse ble utført.
når det gjelder klinisk anamnese, ble det rapportert en enkelt bivirkning av egg, som hadde forekommet i tidlig barndom (9 måneder), etter første inntak av kokt egg. Vanligvis hadde symptomene inkludert hvesing, dyspnø, endring i stemmehøyde, hoste, gråt og blekhet. Den raske involvering av luftveiene indikerte at reaksjonen var alvorlig (barnet ble innlagt på sykehus og behandlet med kortikosteroider og antihistaminer). Etter denne hendelsen ble egg helt utelukket fra barnediet. Videre, da barnet var 9, led han av anafylaktisk sjokk, etter inntak av pinjekjerner.
Kvantitativ SPT ble utført med en rekke 36 kommersielt tilgjengelige matallergener (Lofarma, Milano, Italia), som gjenspeiler spekteret av matallergi I Sør-Italia (hvor folk bruker et typisk Middelhavsdiett). Flere sensibiliseringer ble påvist, inkludert peanøtter, mandler,hasselnøtter, hvete og spesielt egghvite (Fig. 1a). Vi har også utført prick-by-prick, også teste en bakt kake( svamp kake; godt kokte egg) og kokt egg(hardkokt; Fig. 1b). Resultatene ble uttrykt i forhold til forholdet mellom området av allergen wheal og området av det eksogene histamin wheal (referert Til Som Hudindeks). Videre var hvalene oppnådd med egghvite, hardkokt egghvite og bakt egg alle større enn 5 mm (gjennomsnittlig diameter), betraktet som forbundet med høy spesifisitet i barndommen . Disse testene indikerte at gutten var sensibilisert for flere matallergener og at eggallergi fortsatt var tilstede. Når det gjelder de andre matfølsomhetene som ble oppdaget, sa den unge pasienten at han kunne spise hveteavledede matvarer (brød, pasta, etc.), mandler, bønner og solsikkefrø, uten å lide noen allergi symptomer. Han hadde gjennomgått beskjedne symptomer (leppe angioødem) ved sporadisk forbruk av grønne erter og hasselnøtter, mens han ikke kunne huske å ha spist peanøtter, blekksprut, blekksprut og muslinger, av noe slag, noe som tyder på eksistensen av en ekte intoleranse mot disse matvarene.
in vivo og in vitro ige deteksjon. En Kvantitativ SPT for et kommersielt tilgjengelig utvalg av matallergener. Resultatene er uttrykt I Form Av Hud Indeks, jeg.e., forholdet mellom området av allergen wheal og området av det eksogene histamin (10 mg/ml) referanse wheal. B Kvantitativ SPT for kommersielt tilgjengelig eggekstrakt (eggehvite og eggeplomme), og stikk-for-stikk med kokt egg (eggehvite og eggeplomme), og bakt egg (svamp kake). Resultater uttrykt I Form Av Hud Indeks, også. c total serum ige og egg allergen-spesifikk serum ige, målt Ved ImmunoCAP. D Kvantitativ SPT med MMR-vaksine (ufortynnet); kvantitative intradermale tester med MMR-vaksine, henholdsvis 1:100 og 1:10 fortynninger. Resultatene er uttrykt som wheal områder (mm2). Eksogent histamin (0,002 mg / ml) ble brukt til positiv kontroll ved intradermal testing
Videre, Ved ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Milan), evaluerte vi spesifikt ige-nivå i serum for egghvite, OVM, OVA og OVT. Verdiene som ble oppdaget var prediktive for klinisk relevante reaksjoner, etter eggforbruk, som bekreftet hudtestresultatene (Fig. 1c). Totale ige-nivåer var spesielt høye (Fig. 1c).
ETTER å ha vurdert eggallergi, utførte VI SPT med ren MMR-vaksine, som viste seg å være negativ. Deretter utførte vi intradermale tester med to økende fortynninger AV MMR-vaksine (viz. 1/100, 1/10). Som forventet viste denne prosedyren seg også negativ (Fig. 1d). Videre ble 100 µ av 1/10 fortynning AV MMR-vaksine injisert subkutant (injeksjonstest). Ingen umiddelbar reaksjon ble observert, verken lokal eller systemisk.
Til slutt, for å bekrefte fraværet av vaksinespesifikke b-cellekloner, som ville bekrefte resultatene oppnådd in vivo, utførte vi også en ex-vivo b-lymfocyttproliferasjonsanalyse (Fig . 2a-d) . Ved denne tilnærmingen ble også en mulig forsinket allergisk respons mot MMR-vaksinekomponenter undersøkt (proliferasjon av vaksinespesifikke T-celler). Således ble perifere blodmononukleære celler (PBMC) isolert som beskrevet og farget med karboksyfluorescein succinimidylester (CFSE; 5 µ) i 5 min, vasket og dyrket i Dulbeccos modifiserte Eagle ‘ s medium (DMEM), supplert med 10% av pasientens serum. DISSE PBMC-ENE ble eksponert for 3 forskjellige fortynninger av vaksinen (henholdsvis 1/4000, 1/400 og 1/40) i tre eksemplarer mikrokulturer (2 × 105 PBMC i 200 µ), opprettholdt ved 37 °C i en dampmettet atmosfære PÅ 5% co2. Kulturer uten tillegg av vaksine ble brukt som negativ kontroll. Etter 48 timer ble PBMC høstet, vasket og farget med fluorokromkoblede anti-CD19-og ANTI-CD3-antistoffer i 20 minutter. Etter ytterligere vask ble cellene analysert ved flowcytometri (Navios 3L 10C, Beckman Coulter, Milan), for påvisning av prolifererende B – og T-lymfocytter. Det er viktig at ingen B-lymfocyttproliferasjon (CD19+ – celler) ble observert i NÆRVÆR AV MMR-vaksine (Fig. 2a-e). CD3 + celleproliferasjon ble ikke observert, ogsa (data ikke vist).
Ex vivo b-celleproliferasjonsanalyse. Celleproliferasjon vurdert ved reduksjon AV CFSE-intensitet: a i mikrokulturer av ubehandlede b-celler; b-lymfocytter inkubert med en 1:4000 MMR vaksine fortynning; c B-lymfocytter inkubert med en 1:400 MMR vaksine fortynning; og til slutt D B-lymfocytter inkubert med en 1: 40 MMR vaksine fortynning. Resultatene refererer til en av de 2 proliferasjonsanalysene som utføres. I E Stimulering Indekser for 3 MMR vaksine fortynninger ovenfor. Gjennomsnitt av de 2 analysene. Stimuleringsindeksen er forholdet mellom proliferasjonshastigheten til celler utsatt for et potensielt proliferasjonsmiddel og basal proliferasjonshastigheten til kontrollceller. En Stimuleringsindeks ≥ 2 indikerer en signifikant spesifikk spredningsaktivitet. SSC side scatter, CFSE carboxyfluorescein succimydil ester
Basert på dette videre beviset ga VI MMR-vaksinen til gutten, i to doser på 50%, 250 µ hver, med et intervall på en time mellom de to injeksjonene. Pasienten forblir under observasjon i 1 h (etter den andre injeksjonen). Som forventet ble det ikke observert noen umiddelbare eller forsinkede bivirkninger. Derfor kunne han bli tatt tilbake til skolen.
Ni måneder Senere ble b-lymfocyttproliferasjonsanalysen gjentatt med lignende resultater (Fig. 2e). En ANNEN MMR-vaksineadministrasjon ble deretter utført, i henhold til den angitte inokuleringsplanen.