Spre plate teknikk er metoden for isolasjon og opplisting av mikroorganismer i en blandet kultur og distribuere det jevnt. Teknikken gjør det lettere å kvantifisere bakterier i en løsning.
Prinsipp For Spredningsplateteknikk
spredningsplateteknikken innebærer bruk av en sterilisert spreder med en glatt overflate laget av metall eller glass for å påføre en liten mengde bakterier suspendert i en løsning over en plate. Platen må være tørr og ved romtemperatur slik at agar kan absorbere bakteriene lettere. En vellykket spredningsplate vil ha et tellbart antall isolerte bakteriekolonier jevnt fordelt pa platen.
Prosedyre For Spredningsplateteknikk
- Lag en fortynningsserie fra en prøve.
- pipetter ut 0,1 ml Fra ønsket fortynningsserie på midten av overflaten på en agarplate.
- Dypp den l-formede glasssprederen i alkohol.
- Flamme glasssprederen (hockeykølle) over En Bunsenbrenner.
- Spred prøven jevnt over overflaten av agar ved hjelp av den sterile glasssprederen, og roter Petridishen forsiktig under samtidig.
- Inkuber platen ved 37°C i 24 timer.
- Beregn CFU-verdien av prøven. Når du teller koloniene, multipliserer du med riktig fortynningsfaktor for å bestemme antall CFU / mL i den opprinnelige prøven.
Bruk Av Spredningsplateteknikk
- det brukes til levedyktige platetall, der det totale antall kolonidannende enheter på en enkelt plate er oppregnet.
- Det brukes til å beregne konsentrasjonen av celler i røret hvorfra prøven ble belagt.
- Spredning plating brukes rutinemessig i berikelse, utvalg og screening eksperimenter.
Begrensninger Av Spredningsplateteknikk
- Strick aerobes er favorisert mens mikroaerofile har en tendens til å lyse langsommere.
- Trengsel av koloniene gjør opptellingen vanskelig.
- M. J. Pelczar
- Mackie Og McCartney. Praktisk Medisinsk Mikrobiologi
- Bailey & Scotts Diagnostiske Mikrobiologi.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/