Spreidplaattechniek-Principe, Procedure en toepassingen

Spreidplaattechniek is de methode voor het isoleren en tellen van micro-organismen in een gemengde cultuur en het gelijkmatig verdelen ervan. De techniek maakt het makkelijker om bacteriën in een oplossing te kwantificeren.

principe van de Spreidplaattechniek

de spreidplaattechniek omvat het gebruik van een gesteriliseerde spreider met een glad oppervlak gemaakt van metaal of glas om een kleine hoeveelheid in een oplossing gesuspendeerde bacteriën op een plaat aan te brengen. De plaat moet droog en op kamertemperatuur zijn, zodat de agar de bacteriën gemakkelijker kan opnemen. Een succesvolle verspreiding plaat zal een aftelbaar aantal geïsoleerde bacteriële kolonies gelijkmatig verdeeld over de plaat.

procedure van de Spreidplaattechniek

1. Maak een verdunningsreeks van een monster.Pipetteer 0,1 ml uit de gewenste verdunningsreeks op het midden van het oppervlak van een agarplaat.
2. dompel de L-vormige glasblader in alcohol.
3. vuur de glasblader (hockeystick) over een Bunsenbrander.
4. verdeel het monster gelijkmatig over het oppervlak van agar met de steriele glaspreider en draai tegelijkertijd voorzichtig het Petridisch eronder.Incubeer de plaat gedurende 24 uur bij 37°C.
5. Bereken de CFU-waarde van het monster. Nadat u de kolonies hebt geteld, vermenigvuldigt u met de juiste verdunningsfactor om het aantal CFU/mL in het oorspronkelijke monster te bepalen.

gebruik van Spreidplaattechniek

1. het wordt gebruikt voor het tellen van levensvatbare platen, waarbij het totale aantal kolonievormende eenheden op één plaat wordt geteld.
2. het wordt gebruikt voor het berekenen van de concentratie van cellen in de buis waaruit het monster is geplateerd.
3. Spread plating wordt routinematig gebruikt bij verrijkings -, selectie-en screeningsexperimenten.

beperkingen van de Spreidplaattechniek

1. Strickaerobes zijn favoriet, terwijl microaerofiel de neiging heeft langzamer te gloeien.
2. verdringing van de kolonies maakt de telling moeilijk.

1. M. J. Pelczar
2. Mackie and McCartney. Praktische medische microbiologie
3. Bailey & Scott ‘ s diagnostische Microbiologie.
4. Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
5. https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
6. https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
7. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
8. https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
9. https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/