technika rozsiewania płyt jest metodą izolacji i wyliczania mikroorganizmów w hodowli mieszanej i równomiernego jej rozprowadzania. Technika ta ułatwia ilościową ocenę bakterii w roztworze.
zasada działania techniki rozpylania
technika rozpylania polega na zastosowaniu sterylizowanego rozpylacza o gładkiej powierzchni wykonanej z metalu lub szkła w celu nałożenia niewielkiej ilości bakterii zawieszonych w roztworze na płytce. Płyta musi być sucha i w temperaturze pokojowej, aby agar mógł łatwiej wchłonąć bakterie. Udana Płyta rozprzestrzeniania będzie mieć policzalną liczbę izolowanych kolonii bakteryjnych równomiernie rozmieszczone na płycie.
procedura techniki płytki Rozsiewanej
- wykonaj serię rozcieńczeń z próbki.
- wymieszać 0,1 ml z odpowiedniej serii rozcieńczania na środek powierzchni płytki agarowej.
- zanurz szklany rozrzutnik w kształcie litery L w alkoholu.
- rozpal rozrzutnik szkła (kij hokejowy) nad palnikiem Bunsena.
- rozprowadzić próbkę równomiernie na powierzchni agaru za pomocą sterylnego rozrzutnika szkła, ostrożnie obracając Petridish pod spodem w tym samym czasie.
- inkubować płytkę w temperaturze 37°C przez 24 godziny.
- Oblicz wartość JTK próbki. Gdy policzysz kolonie, pomnóż przez odpowiedni współczynnik rozcieńczenia, aby określić liczbę CFU / mL w oryginalnej próbce.
zastosowania techniki płytki Rozsiewanej
- stosuje się ją do liczenia żywotnych płytek, w których wylicza się całkowitą liczbę jednostek tworzących kolonie na pojedynczej płytce.
- służy do obliczania stężenia komórek w probówce, z której próbka została pokryta.
- Poszycie rozprzestrzeniania jest rutynowo stosowane w eksperymentach wzbogacania, selekcji i przesiewania.
ograniczenia techniki rozprzestrzeniania się płytki
- Strick aeroby są preferowane, podczas gdy mikroaerofilne mają tendencję do świecenia wolniej.
- zatłoczenie Kolonii utrudnia wyliczenie.
- M. J. Pelczar
- Mackie i McCartney. Praktyczna Mikrobiologia medyczna
- Bailey & Mikrobiologia diagnostyczna Scotta.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/