prin prezenta, descriem cazul unui băiat de 15 ani, diagnosticat cu alergie severă la ouă, care a fost trimis la clinica noastră pentru că nu a primit niciodată vaccinarea MMR, în ciuda faptului că era obligatorie. Prin urmare, el nu a putut fi admis la școală, în continuare. Într-adevăr, părinții săi au considerat vaccinarea MMR extrem de riscantă din cauza alergiei sale la ouă.
s-a efectuat o analiză alergologică amănunțită.
în ceea ce privește istoricul clinic, a fost raportată o singură reacție adversă la ou, care a apărut la începutul copilăriei (9 luni), după prima ingestie de ou fiert. De obicei, simptomele au inclus respirație șuierătoare, dispnee, schimbare în tonul vocii, tuse, plâns și paloare. Implicarea rapidă a tractului respirator a indicat că reacția a fost severă (copilul a fost internat în spital și tratat cu corticosteroizi și antihistaminice). După acest eveniment, ouăle au fost complet excluse din dieta copilului. Mai mult, când copilul avea 9 ani, a suferit de șoc anafilactic, după ingestia de nuci de pin.
SPT cantitative au fost efectuate cu o serie de 36 de alergeni alimentari disponibili comercial (Lofarma, Milano, Italia), reflectând spectrul alergiilor alimentare din sudul Italiei (unde oamenii consumă o dietă tipică mediteraneană). Au fost detectate sensibilizări Multiple, inclusiv arahide, migdale, alune, grâu și, în special, albus de ou (Fig. 1a). De asemenea, am efectuat prick-by-prick, testând și un tort copt (cozonac; ouă bine gătite) și ou fiert (fiert tare; Fig. 1b). Rezultatele au fost exprimate în termeni de raport între aria alergenului wheal și aria histaminei wheal exogene (denumită indicele pielii). Mai mult, furajele obținute cu albuș de ou, albuș de ou fiert tare și ou copt au fost toate mai mari de 5 mm (diametru mediu), considerate ca fiind asociate cu o specificitate ridicată în copilărie . Aceste teste au indicat că băiatul a fost sensibilizat la mai mulți alergeni alimentari și că alergia la ouă era încă prezentă. În ceea ce privește celelalte sensibilizări alimentare detectate, tânărul pacient a declarat că poate mânca alimente derivate din grâu (pâine, paste etc.), migdale, fasole și semințe de floarea soarelui, fără a suferi simptome alergice. Suferise simptome modeste (angioedem la nivelul buzelor) la consumul ocazional de mazăre verde și alune, în timp ce nu-și amintea să fi mâncat vreodată arahide, sepie, caracatiță și scoici, de orice fel, sugerând existența unei intoleranțe autentice la aceste alimente.
detectarea IgE in vivo și in vitro. un SPT cantitativ pentru o gamă disponibilă în comerț de alergeni alimentari. Rezultatele sunt exprimate în termeni de indice de piele, i.e., raportul dintre zona alergenului wheal și zona histaminei exogene (10 mg/ml) wheal de referință. B SPT cantitativ pentru extractul de ou Disponibil în comerț (albus de ou și gălbenuș) și înțepătură cu înțepătură cu ou fiert (albus de ou și gălbenuș) și ou copt (cozonac). Rezultatele exprimate în termeni de indicele de piele, de asemenea. c IgE seric total și IgE seric specific alergenului din ou, măsurat prin ImmunoCAP. D SPT cantitativ cu vaccin MMR (nediluat); teste cantitative intradermice cu vaccin MMR, la diluții 1:100 și respectiv 1:10. Rezultatele sunt exprimate ca zone wheal (mm2). Histamina exogenă (0,002 mg / ml) a fost utilizată pentru controlul pozitiv în testarea intradermică
mai mult, prin ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Milano), am evaluat nivelul specific de IgE în ser pentru albușul de ou, OVM, ovule și OVT. Valorile detectate au fost predictive ale reacțiilor relevante clinic, în urma consumului de ouă, confirmând rezultatele testelor cutanate (Fig. 1c). Nivelurile totale de IgE au fost deosebit de ridicate (Fig. 1c).
după evaluarea alergiei la ouă, am efectuat SPT cu vaccin MMR pur, care s-a dovedit negativ. Apoi, am efectuat teste intradermice cu două diluții crescânde de vaccin MMR (și anume. 1/100, 1/10). Așa cum era de așteptat, și această procedură s-a dovedit negativă (Fig. 1d). Mai mult, s-au injectat subcutanat 100 ilqql de diluție 1/10 a vaccinului MMR (test de injecție). Nu s-au observat reacții imediate, locale sau sistemice.
în cele din urmă, pentru a confirma absența clonelor de celule B specifice vaccinului, care ar corobora rezultatele obținute in vivo, am efectuat și un test de proliferare a limfocitelor B ex-vivo (Fig. 2a-d). Prin această abordare, a fost investigat și un posibil răspuns alergic întârziat față de componentele vaccinului MMR (proliferarea celulelor T specifice vaccinului). Astfel, celulele mononucleare din sângele periferic (PBMC) au fost izolate așa cum este descris și colorate cu ester succinimidil carboxifluoresceină (CFSE; 5 centimetri) timp de 5 min, spălat și cultivat în mediul vulturului modificat Dulbecco (DMEM), suplimentat cu 10% din serul pacientului. Aceste PBMC au fost expuse la 3 diluții diferite ale vaccinului (1/4000, 1/400 și, respectiv, 1/40), în microculturi triplicate (2% 105% PBMC în 200%), menținute la 37% C într-o atmosferă saturată cu vapori de CO2 5%. Culturile fără adaos de vaccin au fost utilizate ca martor negativ. După 48 de ore, PBMC au fost recoltate, spălate și colorate cu anticorpi anti-CD19 și anti-CD3 cuplați cu fluorocrom, timp de 20 de minute. După spălarea ulterioară, celulele au fost analizate prin citometrie în flux (Navios 3l 10C, Beckman Coulter, Milano), pentru detectarea limfocitelor B și T proliferante. Important, nu a fost observată proliferarea limfocitelor B (celule CD19+) în prezența vaccinului MMR (Fig. 2a-e). De asemenea, nu a fost observată proliferarea celulelor CD3+ (datele nu au fost prezentate).
test de proliferare a celulelor B ex vivo. Proliferarea celulară evaluată prin reducerea intensității CFSE: a în microculturile celulelor B netratate; B B-limfocite incubate cu o diluție de vaccin 1:4000 MMR; C B-limfocite incubate cu o diluție de vaccin 1:400 MMR; și, în final, D B-limfocite incubate cu o diluție de vaccin 1: 40 MMR. Rezultatele se referă la unul dintre cele 2 teste de proliferare efectuate. În e indici de Stimulare pentru cele 3 diluții ale vaccinului MMR de mai sus. Mediile celor 2 teste. Indicele de stimulare este raportul dintre rata de proliferare a celulelor expuse la un potențial agent de proliferare și rata de proliferare bazală a celulelor de control. Un indice de stimulare de la 2 la 2 indică o activitate specifică semnificativă de proliferare. Scatter lateral SSC, CFSE carboxifluoresceină succimidil ester
pe baza acestor dovezi suplimentare, I-am administrat băiatului vaccinul MMR, în două doze de 50%, câte 250 ECQ, cu un interval de o oră între cele două injecții. Pacientul a rămas sub observație timp de 1 oră (după a doua injecție). Așa cum era de așteptat, nu au fost observate reacții adverse imediate sau întârziate. Prin urmare, el ar putea fi readmis la școală.
nouă luni mai târziu, testul de proliferare a limfocitelor B a fost repetat cu rezultate similare (Fig. 2e). Apoi a fost efectuată o a doua administrare a vaccinului MMR, conform programului de inoculare specificat.