tehnica plăcii de împrăștiere este metoda de izolare și enumerare a microorganismelor într-o cultură mixtă și distribuirea uniformă a acesteia. Tehnica facilitează cuantificarea bacteriilor într-o soluție.
principiul tehnicii plăcii de împrăștiere
tehnica plăcii de împrăștiere implică utilizarea unui distribuitor sterilizat cu o suprafață netedă din metal sau sticlă pentru a aplica o cantitate mică de bacterii suspendate într-o soluție peste o placă. Placa trebuie să fie uscată și la temperatura camerei, astfel încât agarul să poată absorbi bacteriile mai ușor. O placă de răspândire reușită va avea un număr numărabil de colonii bacteriene izolate distribuite uniform pe placă.
procedura tehnicii plăcii de împrăștiere
- realizați o serie de diluții dintr-un eșantion.
- se pipetează 0,1 ml din seria de diluare corespunzătoare dorită pe centrul suprafeței unei plăci de agar.
- introduceți distribuitorul de sticlă în formă de L în alcool.
- aprindeți distribuitorul de sticlă (bastonul de hochei) peste un arzător Bunsen.
- împrăștiați eșantionul uniform pe suprafața agarului folosind distribuitorul steril de sticlă, rotind cu atenție Petridish dedesubt în același timp.
- se incubează placa la 37 CTC timp de 24 de ore.
- calculați valoarea CFU a eșantionului. După ce numărați coloniile, înmulțiți cu factorul de diluare adecvat pentru a determina numărul de CFU/mL din eșantionul original.
utilizări ale tehnicii plăcii de împrăștiere
- este utilizat pentru numărarea plăcilor viabile, în care este enumerat numărul total de unități care formează colonii pe o singură placă.
- se utilizează pentru a calcula concentrația celulelor din tubul din care a fost placată proba.
- placarea cu răspândire este utilizată în mod obișnuit în experimentele de îmbogățire, selecție și screening.
limitările tehnicii plăcii de împrăștiere
- aerobii Strick sunt favorizați în timp ce microaerofilul tinde să strălucească mai lent.
- aglomerarea coloniilor face dificilă enumerarea.
- M. J. Pelczar
- Mackie și McCartney. Microbiologie medicală practică
- Bailey & Microbiologia diagnostică a lui Scott.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/