hermed beskriver vi sagen om en 15-årig dreng, diagnosticeret med svær ægallergi, der blev henvist til vores klinik, fordi han aldrig havde modtaget MMR-vaccination, på trods af at det var obligatorisk. Derfor kunne han ikke blive optaget i skole yderligere. Faktisk betragtede hans forældre MMR-vaccination meget risikabel på grund af hans underliggende ægallergi.
en grundig Allergologisk oparbejdning blev udført.
hvad angår den kliniske historie, blev der rapporteret om en enkelt bivirkning på æg, som var forekommet i den tidlige barndom (9 måneder) efter den første indtagelse af kogt æg. Typisk havde symptomerne inkluderet hvæsen, dyspnø, ændring i stemmehøjde, hoste, gråd og blekhed. Den hurtige inddragelse af luftvejene viste, at reaktionen var alvorlig (barnet blev indlagt på hospitalet og behandlet med kortikosteroider og antihistaminer). Efter denne begivenhed blev æg helt udelukket fra barnets kost. Da barnet var 9, led han desuden af anafylaktisk chok efter indtagelse af pinjekerner.
kvantitativ SPT blev udført med en række 36 kommercielt tilgængelige fødevareallergener (Lofarma, Milano, Italien), der afspejler spektret af fødevareallergi i det sydlige Italien (hvor folk spiser en typisk middelhavsdiæt). Flere sensibiliseringer blev påvist, herunder jordnødder, mandler, hasselnødder, hvede og især æggehvide (Fig. 1a). Vi udførte også prik-for-prik og testede også en bagt kage (svampekage; godt kogte æg) og kogt æg (hårdt kogt; Fig. 1b). Resultaterne blev udtrykt i forhold til forholdet mellem området for allergenhvalen og området for den eksogene histaminhval (kaldet Hudindeks). Desuden var hvalerne opnået med æggehvide, hårdkogt æggehvide og bagt æg alle større end 5 mm (gennemsnitlig diameter), betragtes som forbundet med en høj specificitet i barndommen . Disse tests viste, at drengen var sensibiliseret for flere fødevareallergener, og at ægallergi stadig var til stede. Hvad angår de andre detekterede fødevaresensibiliseringer, sagde den unge patient, at han kunne spise hvedeafledte fødevarer (brød, pasta osv.), mandler, bønner og solsikkefrø, uden at lide nogen allergi symptomer. Han havde gennemgået beskedne symptomer (lip angioødem) ved lejlighedsvis forbrug af grønne ærter og hasselnødder, mens han ikke kunne huske, at han nogensinde havde spist jordnødder, blæksprutte, blæksprutte og muslinger af nogen art, hvilket tyder på eksistensen af en ægte intolerance over for disse fødevarer.
in vivo og in vitro IgE påvisning. en kvantitativ SPT for en kommercielt tilgængelig vifte af fødevareallergener. Resultaterne udtrykkes i form af Hudindeks, jeg.e. forholdet mellem arealet af allergenhvalen og arealet af den eksogene histamin (10 mg/ml) referencehval. B kvantitativ SPT for kommercielt tilgængeligt ægekstrakt (æggehvide og æggeblomme) og prik for prik med kogt æg (æggehvide og æggeblomme) og bagt æg (svampekage). Resultater udtrykt i form af Hudindeks, også. c total serum IgE og æg allergen-specifikt serum IgE, målt ved ImmunoCAP. D Kvantitativ SPT med MMR-vaccine (ufortyndet); kvantitative intradermale test med MMR-vaccine ved henholdsvis 1:100 og 1:10 fortyndinger. Resultaterne udtrykkes som hvalområder (mm2). Eksogen histamin (0,002 mg / ml) blev anvendt til positiv kontrol i intradermal test
desuden vurderede vi af ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Milan) specifikt IgE-niveau i serum for æggehvide, OVM, æg og OVT. De påviste værdier var forudsigelige for klinisk relevante reaktioner efter ægforbrug, hvilket bekræftede hudtestresultaterne (Fig. 1c). De samlede IgE-niveauer var særligt høje (Fig. 1c).
efter at have vurderet ægallergi udførte vi SPT med ren MMR-vaccine, hvilket viste sig negativt. Derefter udførte vi intradermale tests med to stigende fortyndinger af MMR-vaccine (nemlig. 1/100, 1/10). Som forventet viste denne procedure sig også negativ (Fig. 1d). Desuden blev 100 liter 1/10 fortynding af MMR-vaccine injiceret subkutant (injektionstest). Der blev ikke observeret nogen øjeblikkelig reaktion, hverken lokal eller systemisk.
endelig for at bekræfte fraværet af vaccinespecifikke B-cellekloner, som ville bekræfte de opnåede resultater in vivo, udførte vi også en eks-Vivo B-lymfocytproliferationsassay (Fig. 2a-d). Ved denne tilgang blev også en mulig forsinket allergisk reaktion over for MMR-vaccinekomponenter undersøgt (proliferation af vaccinespecifikke T-celler). Således blev perifere blodmononukleære celler (PBMC) isoleret som beskrevet og farvet med CARBOKSYFLUORESCEIN succinimidylester (CFSE; 5 liter) i 5 minutter, vasket og dyrket i Dulbecco ‘s modified Eagle’ s medium (DMEM) suppleret med 10% af patientens serum. Disse PBMC ‘ er blev udsat for 3 forskellige fortyndinger af vaccinen (henholdsvis 1/4000, 1/400 og 1/40) i triplikatmikrokulturer (2 liter 105 PBMC i 200 liter), opretholdt ved 37 liter C i en 5% CO2, dampmættet atmosfære. Kulturer uden vaccinetilsætning blev anvendt som negativ kontrol. Efter 48 timer blev PBMC høstet, vasket og farvet med fluorokromkoblede anti-CD19-og anti-CD3-antistoffer i 20 minutter. Efter yderligere vask blev cellerne analyseret ved strømningscytometri (Navios 3L 10c, Beckman Coulter, Milan) til påvisning af prolifererende B – og T-lymfocytter. Det er vigtigt, at der ikke blev observeret nogen B-lymfocytproliferation (CD19+ celler) i nærvær af MMR-vaccine (Fig. 2a-e). CD3 + celleproliferation blev heller ikke observeret (data ikke vist).
B-celleproliferationsanalyse. Celleproliferation vurderet ved reduktion af CFSE-intensitet: a i mikrokulturer af ubehandlede B-celler; B B-lymfocytter inkuberet med en 1:4000 MMR-vaccinefortynding; c B-lymfocytter inkuberet med en 1:400 MMR-vaccinefortynding; og endelig D B-lymfocytter inkuberet med en 1: 40 MMR-vaccinefortynding. Resultaterne henviser til en af de 2 proliferationsanalyser, der er udført. I E-Stimuleringsindekser for de 3 MMR-vaccinefortyndinger ovenfor. Gennemsnit af de 2 analyser. Stimuleringsindekset er forholdet mellem proliferationshastigheden af celler udsat for et potentielt proliferationsmiddel og den basale proliferationshastighed for kontrolceller. Et Stimuleringsindeks kurs 2 indikerer en signifikant specifik proliferationsaktivitet. SSC sidespredning, CFSE carboksyfluorescein succimydil ester
baseret på dette yderligere bevis administrerede vi MMR-vaccinen til drengen i to 50% doser, 250 liter hver, med et interval på en time mellem de to injektioner. Patienten forblev under observation i 1 time (efter den anden injektion). Som forventet blev der ikke observeret øjeblikkelige eller forsinkede bivirkninger. Derfor kunne han genindlægges i skole.
ni måneder senere blev B-lymfocytproliferationsanalysen gentaget med lignende resultater (Fig. 2e). En anden MMR-vaccineadministration blev derefter udført i henhold til den angivne inokulationsplan.