spred plade teknik er metoden til isolering og opregning af mikroorganismer i en blandet kultur og distribuere det jævnt. Teknikken gør det lettere at kvantificere bakterier i en opløsning.
princippet om Spredningspladeteknik
spredepladeteknikken involverer anvendelse af en steriliseret spreder med en glat overflade lavet af metal eller glas til påføring af en lille mængde bakterier suspenderet i en opløsning over en plade. Pladen skal være tør og ved stuetemperatur, så agaren lettere kan absorbere bakterierne. En vellykket spredeplade vil have et tælleligt antal isolerede bakteriekolonier jævnt fordelt på pladen.
fremgangsmåde for Spredningspladeteknik
- lav en fortyndingsserie fra en prøve.
- pipetter 0,1 ml fra den ønskede fortyndingsserie ud på midten af overfladen af en agarplade.
- dyp den L-formede glasspreder i alkohol.
- flammer glassprederen (hockeystav) over en Bunsen-brænder.
- spred prøven jævnt over overfladen af agar ved hjælp af den sterile glasspreder, og drej forsigtigt Petridisken nedenunder på samme tid.
- inkuber pladen ved 37 liter C i 24 timer.
- Beregn CFU-værdien af prøven. Når du tæller kolonierne, skal du multiplicere med den passende fortyndingsfaktor for at bestemme antallet af CFU/mL i den originale prøve.
anvendelser af Spredningspladeteknik
- det bruges til levedygtige pladetællinger, hvor det samlede antal kolonidannende enheder på en enkelt plade er opregnet.
- det bruges til at beregne koncentrationen af celler i røret, hvorfra prøven blev belagt.
- Spredningsplettering anvendes rutinemæssigt i berigelses -, selektions-og screeningseksperimenter.
begrænsninger af Spredningspladeteknik
- Strick aerobes foretrækkes, mens mikroaerofile har tendens til at gløde langsommere.
- trængsel af kolonierne gør optællingen vanskelig.
- M. J. Pelcasar
- Mackie og McCartney. Praktisk medicinsk mikrobiologi
- Bailey & Scotts diagnostiske Mikrobiologi.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/