Spread-Plate-Technik ist die Methode der Isolierung und Aufzählung von Mikroorganismen in einer Mischkultur und deren gleichmäßige Verteilung. Die Technik erleichtert die Quantifizierung von Bakterien in einer Lösung.
Prinzip der Streuplattentechnik
Bei der Streuplattentechnik wird mit einem sterilisierten Streuer mit glatter Oberfläche aus Metall oder Glas eine kleine Menge in einer Lösung suspendierter Bakterien auf eine Platte aufgetragen. Die Platte muss trocken und bei Raumtemperatur sein, damit der Agar die Bakterien leichter aufnehmen kann. Eine erfolgreiche Verteilungsplatte hat eine zählbare Anzahl isolierter Bakterienkolonien, die gleichmäßig auf der Platte verteilt sind.
Verfahren der Spreizplattentechnik
- Machen Sie eine Verdünnungsreihe aus einer Probe.
- 0,1 ml aus der entsprechenden gewünschten Verdünnungsreihe auf die Mitte der Oberfläche einer Agarplatte pipettieren.
- Tauchen Sie den L-förmigen Glasstreuer in Alkohol.
- Den Glasstreuer (Hockeyschläger) über einem Bunsenbrenner beflammen.
- Verteilen Sie die Probe mit dem sterilen Glasstreuer gleichmäßig auf der Oberfläche des Agars und drehen Sie gleichzeitig vorsichtig die Petridish darunter.
- Die Platte 24 Stunden bei 37°C inkubieren.
- Berechnen Sie den KBE-Wert der Probe. Wenn Sie die Kolonien gezählt haben, multiplizieren Sie sie mit dem entsprechenden Verdünnungsfaktor, um die Anzahl der KBE / ml in der Originalprobe zu bestimmen.
Verwendung der Spread-Plate-Technik
- Es wird für die Zählung lebensfähiger Platten verwendet, bei denen die Gesamtzahl der koloniebildenden Einheiten auf einer einzelnen Platte aufgezählt wird.
- Es wird verwendet, um die Konzentration der Zellen in dem Röhrchen zu berechnen, aus dem die Probe entnommen wurde.
- Spreizplattierung wird routinemäßig in Anreicherungs-, Selektions- und Screening-Experimenten verwendet.
Einschränkungen der Spreizplattentechnik
- Strick-Aerobier werden bevorzugt, während Mikroaerophile tendenziell langsamer leuchten.
- Gedränge der Kolonien erschwert die Aufzählung.
- M. J. Pelczar
- Mackie und McCartney. Praktische medizinische Mikrobiologie
- Bailey & Scotts diagnostische Mikrobiologie.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/