La técnica de placa extendida es el método de aislamiento y enumeración de microorganismos en un cultivo mixto y distribución uniforme. La técnica facilita la cuantificación de bacterias en una solución.
Principio de la Técnica de la placa de extensión
La técnica de la placa de extensión implica el uso de un esparcidor esterilizado con una superficie lisa de metal o vidrio para aplicar una pequeña cantidad de bacterias suspendidas en una solución sobre una placa. La placa debe estar seca y a temperatura ambiente para que el agar pueda absorber las bacterias más fácilmente. Una placa de extensión exitosa tendrá un número contable de colonias bacterianas aisladas distribuidas uniformemente en la placa.
Procedimiento de la Técnica de la placa de extensión
- Hacer una serie de dilución a partir de una muestra.
- Pipetee 0,1 ml de la serie de dilución deseada adecuada en el centro de la superficie de una placa de agar.
- Sumerge el esparcidor de vidrio en forma de L en alcohol.
- Llama el esparcidor de vidrio (palo de hockey) sobre un quemador Bunsen.
- Extienda la muestra uniformemente sobre la superficie del agar utilizando el esparcidor de vidrio estéril, girando cuidadosamente el petrídeo por debajo al mismo tiempo.
- Incubar la placa a 37°C durante 24 horas.
- Calcular el valor de UFC de la muestra. Una vez que cuente las colonias, multiplique por el factor de dilución apropiado para determinar el número de UFC/ml en la muestra original.
Usos de la Técnica de placas Extendidas
- Se utiliza para recuentos viables de placas, en los que se enumera el número total de unidades formadoras de colonias en una sola placa.
- Se utiliza para calcular la concentración de células en el tubo del que se plateó la muestra.
- La galjanoplastia por extensión se utiliza rutinariamente en experimentos de enriquecimiento, selección y cribado.
Limitaciones de la Técnica de Placas Extendidas
- Se favorecen los aerobios Strick, mientras que los microaerofílicos tienden a brillar más lentamente.
- El hacinamiento de las colonias dificulta la enumeración.
- M. J. Pelczar
- Mackie y McCartney. Microbiología Médica Práctica
- Bailey & Microbiología Diagnóstica de Scott.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/