Par la présente, nous décrivons le cas d’un garçon de 15 ans, diagnostiqué avec une allergie grave aux œufs, qui a été référé à notre clinique parce qu’il n’avait jamais reçu la vaccination ROR, malgré le fait qu’elle était obligatoire. Par conséquent, il ne pouvait plus être admis à l’école. En effet, ses parents considéraient la vaccination ROR comme très risquée en raison de son allergie sous-jacente aux œufs.
Un examen allergologique approfondi a été effectué.
En ce qui concerne les antécédents cliniques, une seule réaction indésirable à l’œuf a été rapportée, survenue au début de la petite enfance (9 mois), après la première ingestion d’œuf cuit. En règle générale, les symptômes comprenaient une respiration sifflante, une dyspnée, un changement de hauteur de la voix, une toux, des pleurs et une pâleur. L’atteinte rapide des voies respiratoires a indiqué que la réaction était sévère (l’enfant a été hospitalisé et traité avec des corticostéroïdes et des antihistaminiques). Après cet événement, les œufs ont été complètement exclus du régime alimentaire de l’enfant. De plus, à l’âge de 9 ans, l’enfant souffrait d’un choc anaphylactique, après ingestion de pignons de pin.
Des SPT quantitatives ont été réalisées avec une gamme de 36 allergènes alimentaires disponibles dans le commerce (Lofarma, Milan, Italie), reflétant le spectre des allergies alimentaires dans le sud de l’Italie (où les gens consomment un régime méditerranéen typique). De multiples sensibilités ont été détectées, notamment des arachides, des amandes, des noisettes, du blé et, en particulier, du blanc d’œuf (Fig. 1 bis). Nous avons également effectué piqûre par piqûre, en testant également un gâteau cuit au four (génoise; œufs bien cuits) et un œuf cuit (cuit dur; Fig. 1b). Les résultats ont été exprimés en termes de rapport entre la zone de la papule allergène et la zone de la papule histaminique exogène (appelée Indice cutané). De plus, les papules obtenues avec du blanc d’œuf, du blanc d’œuf dur et de l’œuf cuit étaient toutes supérieures à 5 mm (diamètre moyen), considérées comme associées à une spécificité élevée dans l’enfance. Ces tests ont indiqué que le garçon était sensibilisé à de multiples allergènes alimentaires et que l’allergie aux œufs était toujours présente. Quant aux autres sensibilités alimentaires détectées, le jeune patient a déclaré qu’il pouvait manger des aliments dérivés du blé (pain, pâtes, etc.), des amandes, des haricots et des graines de tournesol, sans souffrir de symptômes d’allergie. Il avait subi des symptômes modestes (angio-œdème des lèvres) lors de la consommation occasionnelle de pois verts et de noisettes, alors qu’il ne se souvenait pas avoir déjà mangé des arachides, des seiches, des poulpes et des palourdes, de toutes sortes, suggérant l’existence d’une véritable intolérance à ces aliments.
Détection d’gE in vivo et in vitro. un SPT quantitatif pour une gamme d’allergènes alimentaires disponibles dans le commerce. Les résultats sont exprimés en termes d’indice cutané, i.e. , le rapport entre la zone de la papule allergène et la zone de l’histamine exogène (10 mg / ml) de la papule de référence. b SPT quantitatif pour l’extrait d’œuf disponible dans le commerce (blanc d’œuf et jaune), et piquer par piquer avec l’œuf cuit (blanc d’œuf et jaune) et l’œuf cuit au four (génoise). Résultats exprimés en termes d’indice cutané, également. c Total sériques totales etgE sériques spécifiques à l’allergène des œufs, mesurées par ImmunoCAP. d SPT quantitatif avec vaccin ROR (non dilué); tests intradermiques quantitatifs avec vaccin ROR, à des dilutions 1: 100 et 1: 10, respectivement. Les résultats sont exprimés en aires de papule (mm2). L’histamine exogène (0,002 mg / ml) a été utilisée pour le contrôle positif dans les tests intradermiques
De plus, par ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Milan), nous avons évalué le niveau d’gE spécifique dans le sérum pour le blanc d’œuf, les OVM, les OVA et les OVT. Les valeurs détectées étaient prédictives de réactions cliniquement pertinentes, après la consommation d’œufs, confirmant les résultats des tests cutanés (Fig. 1c). Les niveaux totaux d’gE étaient particulièrement élevés (Fig. 1c).
Après avoir évalué l’allergie aux œufs, nous avons effectué une SPT avec le vaccin ROR pur, qui s’est avéré négatif. Ensuite, nous avons effectué des tests intradermiques avec deux dilutions croissantes du vaccin ROR (à savoir. 1/100, 1/10). Comme prévu, cette procédure s’est également avérée négative (Fig. 1d). De plus, 100 µl de dilution au 1/10 du vaccin ROR ont été injectés par voie sous-cutanée (test d’injection). Aucune réaction immédiate n’a été observée, locale ou systémique.
Enfin, afin de confirmer l’absence de clones de lymphocytes B spécifiques au vaccin, ce qui corroborerait les résultats obtenus in vivo, nous avons également réalisé un test de prolifération des lymphocytes B ex vivo (Fig. 2 bis-d). Par cette approche, une réponse allergique retardée possible aux composants du vaccin ROR a également été étudiée (prolifération de lymphocytes T spécifiques au vaccin). Ainsi, des cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) ont été isolées comme décrit et colorées avec de l’ester succinimidylique de carboxyfluorescéine (CFSE; 5 µM) pendant 5 min, lavés et cultivés dans le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM), additionné de 10% du sérum du patient. Ces PBMC ont été exposés à 3 dilutions différentes du vaccin (respectivement 1/4000, 1/400 et 1/40), dans des micro-cultures triplicatées (2 × 105 PBMC dans 200 µl), maintenues à 37 °C dans une atmosphère saturée en vapeur de CO2 à 5%. Des cultures sans ajout de vaccin ont été utilisées comme témoins négatifs. Après 48 h, les PBMC ont été récoltés, lavés et colorés avec des anticorps anti-CD19 et anti-CD3 couplés au fluorochrome, pendant 20 min. Après un lavage ultérieur, les cellules ont été analysées par cytométrie en flux (Navios 3L 10C, Beckman Coulter, Milan), pour la détection de lymphocytes B et T proliférants. Fait important, aucune prolifération de lymphocytes B (cellules CD19+) n’a été observée en présence du vaccin ROR (Fig. 2 bis-e). La prolifération des cellules CD3+ n’a pas non plus été observée (données non montrées).
Test de prolifération ex vivo des cellules B. Prolifération cellulaire évaluée par réduction de l’intensité de l’ESFC: a dans les microcultures de cellules B non traitées; b- lymphocytes B incubés avec une dilution du vaccin ROR 1: 4000; c- lymphocytes B incubés avec une dilution du vaccin ROR 1: 400; et, enfin, d- lymphocytes B incubés avec une dilution du vaccin ROR 1: 40. Les résultats se réfèrent à l’un des 2 tests de prolifération effectués. Index de stimulation en e pour les dilutions de vaccin ROR 3 ci-dessus. Moyennes des 2 essais. L’indice de stimulation est le rapport entre le taux de prolifération des cellules exposées à un agent de prolifération potentiel et le taux de prolifération basale des cellules témoins. Un indice de stimulation ≥ 2 indique une activité de prolifération spécifique significative. Dispersion latérale SSC, ester de succimydil de carboxyfluorescéine CFSE
Sur la base de ces preuves supplémentaires, nous avons administré le vaccin ROR au garçon, en deux doses de 50%, 250 µl chacune, avec un intervalle d’une heure entre les deux injections. Le patient est resté en observation pendant 1 h (après la deuxième injection). Comme prévu, aucun effet indésirable immédiat ou différé n’a été observé. Par conséquent, il pourrait être réadmis à l’école.
Neuf mois plus tard, le test de prolifération des lymphocytes B a été répété avec des résultats similaires (Fig. 2e). Une deuxième administration de vaccin ROR a ensuite été effectuée, selon le calendrier d’inoculation spécifié.