La technique de plaque étalée est la méthode d’isolement et de dénombrement des micro-organismes dans une culture mixte et de répartition uniforme. La technique facilite la quantification des bactéries dans une solution.
Principe de la technique de la plaque d’épandage
La technique de la plaque d’épandage consiste à utiliser un épandeur stérilisé avec une surface lisse en métal ou en verre pour appliquer une petite quantité de bactéries en suspension dans une solution sur une plaque. La plaque doit être sèche et à température ambiante pour que la gélose puisse absorber plus facilement les bactéries. Une plaque de propagation réussie aura un nombre dénombrable de colonies bactériennes isolées réparties uniformément sur la plaque.
Procédure de la technique de la plaque d’étalement
- Faire une série de dilution à partir d’un échantillon.
- Pipeter 0,1 ml de la série de dilution désirée appropriée sur le centre de la surface d’une plaque de gélose.
- Trempez l’épandeur en verre en forme de L dans de l’alcool.
- Enflammer l’épandeur de verre (bâton de hockey) au-dessus d’un brûleur Bunsen.
- Étalez l’échantillon uniformément sur la surface de la gélose à l’aide de l’épandeur de verre stérile, en tournant soigneusement le pétrissage en dessous en même temps.
- Incuber la plaque à 37°C pendant 24 heures.
- Calculez la valeur CFU de l’échantillon. Une fois que vous avez compté les colonies, multipliez par le facteur de dilution approprié pour déterminer le nombre d’UFC / mL dans l’échantillon d’origine.
Utilisations de la technique des plaques étalées
- Elle est utilisée pour des dénombrements de plaques viables, dans lesquels le nombre total d’unités formant colonie sur une seule plaque est dénombré.
- Il est utilisé pour calculer la concentration de cellules dans le tube à partir duquel l’échantillon a été plaqué.
- Le placage étalé est couramment utilisé dans les expériences d’enrichissement, de sélection et de criblage.
Limites de la technique des plaques d’étalement
- Les aérobies Strick sont favorisées tandis que les microaérophiles ont tendance à briller plus lentement.
- L’encombrement des colonies rend le dénombrement difficile.
- Il s’agit de la première édition de la série. Microbiologie médicale pratique
- Bailey & Microbiologie diagnostique de Scott.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/