härmed beskriver vi fallet med en 15-årig pojke, diagnostiserad med svår äggallergi, som hänvisades till vår klinik eftersom han aldrig hade fått MMR-vaccination, trots att det var obligatoriskt. Därför kunde han inte bli antagen till skolan vidare. Faktum är att hans föräldrar ansåg MMR-vaccination mycket riskabelt på grund av hans underliggande äggallergi.
en grundlig allergologisk upparbetning utfördes.
vad gäller den kliniska historien rapporterades en enda biverkning på ägg, som hade inträffat i tidig spädbarn (9 månader) efter det första intaget av kokt ägg. Vanligtvis hade symtomen inkluderat väsande andning, andnöd, förändring i rösthöjd, hosta, gråt och blekhet. Det snabba engagemanget i luftvägarna indikerade att reaktionen var svår (barnet var på sjukhus och behandlades med kortikosteroider och antihistaminer). Efter denna händelse var ägg helt uteslutna från barndieten. Dessutom, när barnet var 9, led han av anafylaktisk chock efter intag av pinjenötter.
kvantitativ SPT utfördes med en uppsättning av 36 kommersiellt tillgängliga matallergener (Lofarma, Milano, Italien), vilket återspeglar spektrumet av matallergi i södra Italien (där människor konsumerar en typisk Medelhavsdiet). Flera sensibiliseringar detekterades, inklusive jordnötter, mandlar, hasselnötter, vete och särskilt äggvita (Fig. 1a). Vi utförde också prick-by-prick, testade också en bakad tårta (svampkaka, välkokta ägg) och kokt ägg (hårdkokt; Fig. 1b). Resultaten uttrycktes i förhållande mellan området för allergen wheal och området för det exogena histamin wheal (kallat Hudindex). Dessutom var valarna erhållna med äggvita, hårdkokt äggvita och bakat ägg alla större än 5 mm (medeldiameter), betraktade som associerade med en hög specificitet i barndomen . Dessa tester visade att pojken var sensibiliserad för flera matallergener och att äggallergi fortfarande var närvarande. När det gäller de andra livsmedelssensibiliseringarna som upptäckts uppgav den unga patienten att han kunde äta vete-härledda livsmedel (bröd, pasta etc.), mandlar, bönor och solrosfrön, utan att drabbas av några allergysymtom. Han hade genomgått blygsamma symtom (läppangeödem) vid tillfällig konsumtion av gröna ärtor och hasselnötter, medan han inte kunde komma ihåg att han någonsin ätit jordnötter, bläckfisk, bläckfisk och musslor av något slag, vilket tyder på att det finns en verklig intolerans mot dessa livsmedel.
in vivo och in vitro IgE-detektion. en kvantitativ SPT för ett kommersiellt tillgängligt utbud av livsmedelallergener. Resultaten uttrycks i termer av Hudindex, jag.E., förhållandet mellan området för allergen wheal och området för exogen histamin (10 mg/ml) referens wheal. B kvantitativ SPT för kommersiellt tillgängligt äggextrakt (äggvita och äggula) och prick-för-prick med kokt ägg (äggvita och äggula) och bakat ägg (svampkaka). Resultat uttryckt i termer av Hudindex, också. C totalt serum IgE och äggallergenspecifikt serum IgE, mätt med ImmunoCAP. D kvantitativ SPT med MMR-vaccin( outspädd); kvantitativa intradermala tester med MMR-vaccin, vid 1:100 respektive 1:10 utspädningar. Resultaten uttrycks som wheal områden (mm2). Exogen histamin (0,002 mg/ml) användes för positiv kontroll vid intradermal testning
vidare utvärderade vi genom ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Milan) specifik IgE-nivå i serum för äggvita, OVM, ägg och OVT. De detekterade värdena var prediktiva för kliniskt relevanta reaktioner, efter äggförbrukning, vilket bekräftade hudtestresultaten (Fig. 1c). Totala IgE-nivåer var särskilt höga (Fig. 1c).
efter att ha bedömt äggallergi utförde vi SPT med rent MMR-vaccin, vilket visade sig vara negativt. Sedan utförde vi intradermala tester med två ökande utspädningar av MMR-vaccin(dvs. 1/100, 1/10). Som förväntat visade sig även detta förfarande negativt (Fig. 1d). Dessutom injicerades 100 oc 1/10 utspädning av MMR-vaccin subkutant (injektionstest). Ingen omedelbar reaktion observerades, varken lokal eller systemisk.
slutligen, för att bekräfta frånvaron av vaccinspecifika B-cellkloner, vilket skulle bekräfta de erhållna resultaten in vivo, utförde vi också en ex-vivo B-lymfocytproliferationsanalys (Fig. 2a-d). Genom detta tillvägagångssätt undersöktes också ett eventuellt försenat allergiskt svar mot MMR-vaccinkomponenter (proliferation av vaccinspecifika T-celler). Således isolerades perifera blodmononukleära celler (PBMC) såsom beskrivits och färgades med karboxifluoresceinsuccinimidylester (CFSE; 5 occurm) i 5 min, tvättas och odlas i dulbeccos modifierade Eagle ’ s medium (DMEM), kompletterat med 10% av patientens serum. Dessa PBMC exponerades för 3 olika utspädningar av vaccinet (1/4000, 1/400 och 1/40, respektive), i tredubbla mikrokulturer (2 105 105 200 CCB), bibehålls vid 37 CCB i en 5% CO2, ångmättad atmosfär. Kulturer utan vaccintillsats användes som negativ kontroll. Efter 48 h skördades PBMC, tvättades och färgades med fluorokromkopplade Anti-CD19-och anti-CD3-antikroppar i 20 minuter. Efter ytterligare tvättning analyserades cellerna med flödescytometri (Navios 3L 10c, Beckman Coulter, Milano) för detektering av prolifererande B – och T-lymfocyter. Det är viktigt att ingen b-lymfocytproliferation (CD19+ – celler) observerades i närvaro av MMR-vaccin (Fig. 2a-e). CD3 + cellproliferation observerades inte heller (data visas inte).
Ex vivo B-cellproliferationstest. Cellproliferation bedömd genom reduktion av CFSE-intensitet: a i mikrokulturer av obehandlade B-celler; b B-lymfocyter inkuberas med en 1:4000 MMR-vaccinutspädning; c B-lymfocyter inkuberas med en 1:400 MMR-vaccinutspädning; och slutligen inkuberas d B-lymfocyter med en 1: 40 MMR-vaccinutspädning. Resultaten hänvisar till en av de 2 proliferationsanalyser som utförts. I e-stimuleringsindex för 3 MMR-vaccinutspädningarna ovan. Medelvärden av de 2 analyserna. Stimuleringsindexet är förhållandet mellan proliferationshastigheten för celler utsatta för ett potentiellt proliferationsmedel och basal proliferationshastigheten för kontrollceller. Ett stimuleringsindex 2 2 indikerar en signifikant specifik proliferationsaktivitet. SSC sido scatter, CFSE karboxyfluorescein succimydilester
baserat på detta ytterligare bevis administrerade vi MMR-vaccinet till pojken, i två 50% doser, 250 oktyl vardera, med ett intervall på en timme mellan de två injektionerna. Patienten förblev under observation i 1 h (efter den andra injektionen). Som förväntat observerades inga omedelbara eller fördröjda biverkningar. Därför kunde han återtas till skolan.
nio månader senare upprepades B-lymfocytproliferationsanalysen med liknande resultat (Fig. 2e). En andra MMR-vaccinadministration utfördes sedan enligt det angivna inokulationsschemat.