17.4.4.3 saponiner
i ett försök att studera saponins bidrag till den antidiabetiska och antiobesity effekten av bockhornsklöverfrön, Uemura et al. (2011) undersökte leverlipidmetabolism/lipogenes hos diabetiska feta kk-Ay-möss som matades med HFD (60% energi som fett) i 4 veckor i närvaro eller frånvaro 0.5% eller 2% fenegreek. De noterade att lever-och plasma-TG-och mRNA-uttrycksnivåerna av lipogena gener sänktes av 2% – tillskottet men inte 0.5% – frön. Intressant visade in vitro-studier med hepatocyter HepG2-celler att det var den hydrolyserade saponinfraktionen, men inte hela saponin, som var ansvarig för den observerade inhiberingen av TG-ackumulering. En ytterligare bioassay-styrd fraktioneringsstudie avslöjade att diosgenin var den aktiva principen eftersom 5 eller 10 kg koncentration var tillräcklig för att hämma ackumuleringen av TG och uttryck av lipogena gener i HepG2-celler. Ytterligare luciferas-och gelmobilitetsförskjutningsanalyser bekräftade att diosgenin hämmar transaktiveringen av lever-X-receptor-sackarios (LXR-SACKARIOS). I modellen för IGGT-test hos möss som fick HFD noterades förbättring av glukoskontroll av fenugreekfurostanoliska saponiner tillsammans med serum-TG som höjdes efter utfodring med HFD (Hua et al., 2015).
i djurförsök som efterliknar T1D och T2D har diosgenin framträtt som en framträdande aktiv princip som allvarligt bör betraktas som ett potentiellt terapeutiskt medel. I de STZ-inducerade och andra T2D-råttmodellerna, till exempel, hypoglykemiska effekter (Kalailingam et al., 2014; Pari et al., 2012; Saravanan et al., 2014; Sangeetha et al., 2013) har visats väl, medan andra markörer av diabetes som HbA1c också har visat sig undertryckas (Kalailingam et al., 2014; Pari et al., 2012). Diabetesassocierade abnormiteter som framgår av undertryckandet av serumnivå av markörer såsom ALT och AST, förbättring av antioxidantförsvar som framgår av ökad SOD, CAT, GSH, GSH-peroxidas (GPx) eller reduktion av TBARS och ROS (Kalailingam et al., 2014; Pari et al., 2012; Sangeetha et al., 2013; Son et al., 2007; Tharaheswari et al., 2014) observeras alla för denna förening. En annan intressant biologisk aktivitet av denna förening i dessa djurmodeller som är relevanta för glykemisk kontroll är dess undertryckande effekt på glukos-6-fosfatas (G6pas) medan GK-aktiviteten förbättras och leverglykogennivån ökas (Kalailingam et al., 2014; Tharaheswari et al., 2014). Den lipidsänkande effekten av föreningen har också visats i de olika diabetiska, HFD-och diabetiska fetma mössen (t.ex. KK-Ay-möss) modeller. Därför dokumenterades en minskning av serum LDL, serum TC, FFAs, serum TG, leverkolesterol, leversteatos, mindre adipocytstorlek och en ökning av serum HDL, kolesterolutsöndring, gallkolesterolsekretion, ökad adipogenes (Kalailingam et al., 2014; Sangeetha et al., 2013; Tang et al., 2011; Tharaheswari et al., 2014; Turer et al., 2012). Förbättringen av lipid-och glykemisk kontroll av föreningen kan också bero på dess kända antiinflammatoriska effekt både in vitro och in vivo, vilket framgår av undertryckandet av nivån och aktiviteten hos makrofagkemoattraktantprotein-1 (MCP-1), TNF-Kazaki, interleukin-6 (IL-6), NF-kB, och ökad leptin, PPAR-Kazaki, minskning av makrofaginfiltration och adipocytininflammation (Hirai et al., 2010; Tharaheswari et al., 2014; Uemura et al., 2010). En minskning av SREBP-1C, FAS, stearoyl-CoA-desaturas (SCD-1), acetyl-CoA-karboxylas (ACC) och lxra-aktivering i cellulära (HEPO-G2) och djurdiabetiska fetma modeller har också rapporterats (Turer et al., 2012). Den antiinflammatoriska och antioxidantpotentialen hos denna steroidförening på de olika primära odlade cellerna (t.ex. endotelceller, Manivannan et al., 2013a) och djurmodeller av ischemi (Badalzadeh et al., 2014; Liu et al., 2012b; Manivannan et al., 2013b), njurskada (Manivannan et al., 2014; Salimeh et al., 2013) har också rapporterats i stor utsträckning. Alla dessa data visade att en minskning av nivån av proinflammatoriska cytokiner (TNF-XXL, IL-1 och IL-6), proinflammatoriska signaler (IKK-XXL och NF-kB), tarminflammation (t.ex. Yamada et al., 1997); ROS, NO, lipidperoxidation och LDH; ökat i antioxidantförsvar (GSH, SOD och CAT) induceras av denna förening. De undertryckande effekterna i inflammatoriska förändringar inom specifika interaktioner mellan adipocyter och makrofager har också dokumenterats väl (Hirai et al., 2010).
behandling av KK-Ay-möss med en HFD kompletterad med 2% bockhornsklöver har visat sig förbättra diabetes i kombination med att minska storleken på adipocyter och ökade mRNA-uttrycksnivåer av differentieringsrelaterade gener i fettvävnader; hämning av makrofaginfiltration i fettvävnader och minskade mRNA-uttrycksnivåer av inflammatoriska gener (Uemura et al., 2010). På samma sätt främjar diosgenin adipocytdifferentiering och hämmar uttrycksnivåerna hos flera molekylära kandidater associerade med inflammation i 3T3-L1-celler (Uemura et al., 2010). De hypokolesterolemiska egenskaperna hos etanolextraktet från avfettade fenugreekfrön undersöktes också av Stark och Madar (1993). Fraktionering av det råa etanolextraktet genom dialys ledde till sammanslagningen av saponinerna som identifierades med deras TLC-profil och hemolytiska egenskaper. Dialysatet, som befanns innehålla saponiner vid bedömning med tunnskiktskromatografi, visades hämma taurokolat och deoxikolatabsorption på ett dosberoende sätt; i två separata utfodringsexperiment (30 eller 50 g etanolextrakt/kg under en 4-veckorsperiod) visade hyperkolesterolemiska råttor en minskning av plasmakolesterolnivåerna från 18% till 26%. En tendens till lägre koncentrationer av leverkolesterol observerades också. Etanolextraktet av fenugreekfrön berikat med saponiner kan således visa hypokolesterolemisk effekt genom interaktion med gallsalter i matsmältningskanalen.
Petit et al. (1995) har visat att saponiner (furostanoltyp) som koncentrerades till minst 90% av extraktet har djupgående effekt på utfodringsbeteende och metaboliska endokrina förändringar hos normala och Stz-diabetiska råttor när de administreras kroniskt (12,5 mg/dag per 300 g kroppsvikt, p.o.). De observerade en signifikant ökning av matintaget och motivationen att äta hos normala råttor, samtidigt som man ändrade dygnsrytmen för utfodringsbeteende. Fenugreek saponiner stabiliserade också livsmedelskonsumtionen hos diabetiska råttor, vilket resulterade i en progressiv viktökning hos dessa djur. Både hos normala och diabetiska råttor minskade steroida saponiner TC utan någon förändring i TG.
eftersom alla ovan nämnda djurförsök visade att diosgenin tolereras väl med begränsad toxicitet i de terapeutiskt tillämpliga doserna, har föreningen terapeutisk potential att utnyttjas som antidiabetiskt och lipidsänkande medel. Subkroniska toxicitetsstudier på föreningen är också i god överensstämmelse med denna slutsats (Qin et al., 2009). Med tanke på den långa listan av saponiner isolerade från bockhornsklöver frön (avsnitt 17.3.2), är det ingen tvekan om att mer saponinbaserade aktiva principer skulle upptäckas från fenugreekfrön i framtiden. Dessa föreningar är också mycket vattenlösliga och passerar genom membran på grund av deras amfifila natur. Faktum är att efter oral enstaka dos (200 mg/kg) hos råttor kunde furostanolglykosider detekteras i lungan och även i hjärnan; vilket indikerade att de kunde korsa blod–hjärnbarriären. De uppvisar också långsam distribution till vävnader men har snabb renal eliminering (Kandhare et al., 2015).