Spridplattteknik är metoden för isolering och uppräkning av mikroorganismer i en blandad kultur och fördelar den jämnt. Tekniken gör det lättare att kvantifiera bakterier i en lösning.
princip för Spridningsplattteknik
spridningsplatttekniken innebär att man använder en steriliserad spridare med en slät yta av metall eller glas för att applicera en liten mängd bakterier suspenderade i en lösning över en platta. Plattan måste vara torr och vid rumstemperatur så att agaren lättare kan absorbera bakterierna. En framgångsrik spridningsplatta kommer att ha ett talbart antal isolerade bakteriekolonier jämnt fördelade på plattan.
förfarande för Spridningsplattteknik
- gör en utspädningsserie från ett prov.
- pipettera ut 0,1 ml från lämplig önskad utspädningsserie på mitten av ytan på en agarplatta.
- doppa den L-formade glasspridaren i alkohol.
- flamma glasspridaren (hockeyklubba) över en bunsenbrännare.
- sprid provet jämnt över ytan av agar med den sterila glasspridaren och vrid försiktigt Petridisken under samtidigt.
- inkubera plattan vid 37 kcal C i 24 timmar.
- beräkna CFU-värdet för provet. När du har räknat kolonierna multiplicerar du med lämplig utspädningsfaktor för att bestämma antalet CFU/mL i det ursprungliga provet.
användning av Spridningsplattteknik
- den används för livskraftiga plattantal, där det totala antalet kolonibildande enheter på en enda platta räknas upp.
- det används för att beräkna koncentrationen av celler i röret från vilket provet pläterades.
- Spread plating används rutinmässigt i anriknings -, urvals-och screeningexperiment.
begränsningar av Spridningsplattteknik
- Strick aerobes gynnas medan mikroaerofil tenderar att glöda långsammare.
- trängsel av kolonierna gör uppräkningen svår.
- M. J. Pelczar
- Mackie och McCartney. Praktisk medicinsk mikrobiologi
- Bailey & Scotts diagnostiska mikrobiologi.
- Practical Microbiology. Pradeep Kumar Sharma.
- https://www.reference.com/science/spread-plate-technique-a3da655650023683#
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3577269/
- https://www.jove.com/video/3064/aseptic-laboratory-techniques-plating-methods
- https://www.pinterest.com/pin/506232814336422077/