az Invitrogen által az 1990-es évek vége óta feltalált és forgalomba hozott Gateway klónozó rendszer egy molekuláris biológiai módszer, amely lehetővé teszi a kutatók számára, hogy hatékonyan átvigyék a DNS-fragmenseket a plazmidok között egy szabadalmaztatott rekombinációs szekvenciák, a “Gateway att” helyek és két szabadalmaztatott enzimkeverék, az úgynevezett “LR Clonase” és a “BP Clonase”segítségével. A Gateway klónozási technika lehetővé teszi a DNS-fragmensek átvitelét a különböző klónozási Vektorok között, miközben megőrzi az olvasási keretet. A Gateway használatával klónozhatjuk a SZUBKLÓN DNS szegmenseit funkcionális elemzéshez. A rendszer megköveteli egy DNS-fragmentum kezdeti beillesztését egy plazmidba, két szomszédos rekombinációs szekvenciával, az úgynevezett “att L 1” és “att L 2”, hogy kifejlesszen egy “Gateway Entry clone” – t (speciális Invitrogen nómenklatúra).
az emberi, egér és patkány ORF-ek (nyílt olvasási keretek) túlnyomó többségét tartalmazó Gateway Entry klónok nagy archívumait emberi cDNS könyvtárakból klónozták, vagy kémiailag szintetizálták a kutatóközösség támogatására NIH (National Institutes of Health) finanszírozás (pl. emlős Géngyűjtemény, http://mgc.nci.nih.gov/). Ezeknek a génkazettáknak a rendelkezésre állása egy szabványos átjáró klónozó plazmidban segít a kutatóknak gyorsan átvinni ezeket a kazettákat plazmidokba, amelyek megkönnyítik a génfunkció elemzését. Az átjáró klónozása több időt vesz igénybe a kezdeti beállításhoz, és drágább, mint a hagyományos restrikciós enzim és ligáz alapú klónozási módszerek, de időt takarít meg, és egyszerűbb és rendkívül hatékony klónozást kínál a down-stream alkalmazásokhoz.
a technológiát az élettudományi kutatóközösség széles körben alkalmazta, különösen olyan alkalmazásokhoz, amelyek több ezer DNS-fragmentum átvitelét igénylik egy típusú plazmidba (pl. egy CMV-promótert tartalmaz az emlős sejtekben a fehérje expressziójához), vagy egy DNS-fragmentum sok különböző típusú plazmidba történő átviteléhez (pl. baktériumok, rovarok és emlősök fehérje expressziójához).