este estranho organismo em forma de pêra é Trichomonas vaginalis, o único parasita unicelular responsável pela doença sexualmente transmissível não viralmente mais comum no mundo, a tricomoníase.Os seres humanos são o único hospedeiro de T. vaginalis e a transmissão direta ocorre de pessoa para pessoa durante a relação sexual. O parasita reproduz-se por fissão binária e não há evidência de formação de quisto. É anaeróbico, sem mitocôndrio, e é um parasita obrigatório que habita as extensões urogenitais de machos e fêmeas onde se move usando quatro filamentos tipo fio chamados flagella.
em 2008, a Organização Mundial de saúde estimou que 276 milhões de pessoas foram infectadas em todo o mundo. Neste contexto, só nos Estados Unidos, 3,1% das mulheres entre os 14 e os 45 anos estão infectadas. Embora a maioria destas infecções não apresentem sintomas, a infecção pode levar a vaginite, cervicite ou prostatite e está associada a um aumento do risco de infecção pelo VIH e de cancro do colo do útero ou da próstata. Também pode afectar negativamente o resultado da gravidez.Como causa patologia?
T. vaginalis liga-se a vários tipos de células hospedeiras, tais como as que envolvem a vagina e o prostrado (células epiteliais). As células então lêem libertando nutrientes para o parasita. A forma como se liga às células e provoca a sua lise é mal compreendida, embora se saiba que o contacto com as células hospedeiras é necessário para a sua lise.Se a adesão celular for um passo inicial na lise celular, é provável que moléculas na superfície do parasita estejam envolvidas neste processo. Sabemos que o parasita é revestido em moléculas de lipofosfoglicano (GPL) que se ligam a uma proteína de mamífero na superfície celular chamada galectin-1. Mas se a produção de galectina for reduzida em células de mamíferos, a ligação ao parasita é reduzida em pequena quantidade. Então esta não é a história toda.Também foi demonstrado que a T. vaginalis adere especificamente à célula epitelial vaginal por meio de proteínas chamadas adesinas e enzimas da protease cisteína também estão envolvidas na citoaderência e outros aspectos da patogênese.
em 2010 Patricia Johnson abordou o problema olhando para proteínas parasitárias. A sua equipa identificou proteínas na superfície de seis estirpes de T. vaginalis com capacidade variável de aderir às células hospedeiras. Eles encontraram 11 proteínas que eram mais abundantes nas estirpes mais adesivas e quando duas delas estavam sobre-expressas em estirpes menos aderentes, a adesão aumentou.Recentemente, o Grupo Johnson voltou a sua atenção para duas proteínas Tipo losango vaginalis. Estas proteínas do romboid são proteases serinas localizadas em membranas celulares, com seus locais ativos dentro da camada lipídica. Eles clivam outras proteínas transmembranares e os produtos da clivagem são geralmente liberados para o exterior da célula. Eles regulam uma infinidade de funções biológicas e, em outros protozoários parasitas, tem sido demonstrado que clivam moléculas de adesão.
a análise Bioinformática revelou 4 proteínas do losango susceptíveis de serem proteases activas em T. vaginalis. Um deles, TvROM1 foi mostrado para ser localizado na superfície celular. O TvROM2 e o 3 foram localizados no aparelho Golgi e o TvROM4 não pôde ser localizado e foi excluído do estudo.
para determinar se as proteínas do losango estavam realmente envolvidas na aderência celular do hospedeiro e na lise, foram utilizadas monocamadas de células ectocervicais. T. parasitas vaginalis foram colocados no sistema de cultura na presença de um inibidor da protease romboídeo. Tanto a ligação às células como a sua lise foram inibidas de forma dependente da dose, sugerindo que as proteases romboid desempenham de facto um papel tanto na ligação do parasita às células hospedeiras como na sua destruição.
no Entanto, quando esses três romboidal proteases foram overexpressed em transfected parasitas, apenas TvROM1, o romboidal protease localizado na superfície da célula, causado um aumento na célula anexo e lise.
à procura de substratos para o TvROM1
hipóteses de que o substrato clivado pelo TvROM1 seria libertado da superfície de T. vaginalis, o Grupo Johnson recolheu moléculas libertadas dos parasitas transfectados para o meio de cultura na presença ou ausência de um inibidor da protease serina e submeteu-as a espectrometria de massa. Abordagens quantitativas Proteómica e bioinformática identificaram duas proteínas semelhantes como substratos de TvROM1 com pequenos aminoácidos em torno dos potenciais locais de clivagem susceptíveis de estar no domínio transmembranar. Estas proteínas não puderam ser clivadas pelo TvROM3.
TvROM1 só podia clivar o domínio transmembranar de um substrato, a clivagem ocorrendo na face externa do domínio transmembranar ou perto dela.O grupo mostrou acumulação de substrato na superfície do parasita. A ligação dos parasitas mutantes às células hospedeiras foi significativamente aumentada, sugerindo um papel direto para este substrato em ligação. No entanto, a lise não aumentou, indicando factores adicionais que estão envolvidos na lise da célula hospedeira.
esta elegante série de investigações apoia a visão de que uma proteína romboid localizada na membrana plasmática de T. vaginalis e seu substrato têm um papel a desempenhar na patologia da tricomaníase. Os autores sugerem que a clivagem TvROM1 do seu substrato pode sinalizar um aumento das proteínas aderentes no parasita ou na superfície celular do hospedeiro durante a fase inicial de ligação.
informação útil
adesão celular e lise das células hospedeiras é claramente um processo complexo que requer múltiplos factores de origem parasitária. A adição de proteínas parecidas com losango a esta lista aumentou o número de moléculas candidatas que poderiam ser alvo de vacinas multifacetadas dirigidas contra T. vaginalis. Até agora, a produção de uma vacina contra qualquer parasita protozoário tem escapado à nossa comunidade, mas talvez isso nos tenha levado um pequeno passo em frente rumo a este objectivo.